青霉素酰化酶交联酶聚体的制备及热失活动力学

• 作者: 何志敏 慕洋洋 王梦凡 甄倩楠 苏荣欣 齐崴
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 交联酶聚体 青霉素酰化酶 固定化 稳定性 热失活动力学
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 有机化学(Organic Chemistry)
• 页码范围: 1212-1218
• 页数: 7页
• 分类号: O629.8|Q814.2
• 字数: 3971字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7503/cjcu20131009

摘要

以0.53 g/ mL 硫酸铵为沉淀剂,0.35%(体积分数)戊二醛为交联剂制得青霉素酰化酶交联酶聚体(CLEAs),酶活收率30.1%,其最适温度(57℃)比游离酶提高10℃,最适 pH(10.0)向碱性偏移1.7个单位.对比游离酶及其 CLEAs 的热稳定性和热失活动力学模型发现,游离青霉素酰化酶制成 CLEAs 后,其热失活动力学模型由一步失活转变为连串失活,失活反应活化能由248.8 kJ/ mol 增加至549.2 kJ/ mol,对CLEAs 热稳定性大幅提高的原因进行了解释. CLEAs 重复利用7次后,酶活保留56%以上,具有良好的重复利用性.