暗黑鳃金龟幼虫羧酸酯酶基因的克隆及其在不同组织中的表达水平研究

• 作者: 孙晓彤 李瑞军 赵丹 郭巍 陆秀君
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 暗黑鳃金龟 cDNA表达文库 羧酸酯酶基因 组织表达
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 页码范围: 86-90
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2014.0094

摘要

通过对暗黑鳃金龟幼虫中肠cDNA文库的免疫筛选,得到一个编码羧酸酯酶的全长基因hc19.经NCBI Blast分析,该基因编码的氨基酸序列包含有Esterase/lipase superfamily的保守结构域,含羧酸酯酶B型丝氨酸活性位点FGGdpnkVtLaGySAG.序列比对表明,其与华北大黑鳃金龟有较高同源性.hc19在大肠杆菌中表达大约59 kDa的目的蛋白条带.以α-醋酸萘酯溶液为底物与粗酶液混合,测其活性,平均酶活力为0.091 mmol/100μL酶液.实时定量PCR表明羧酸酯酶基因hc19在中肠中表达量最高.