中国南海石头鱼毒素NeoVTX的分离纯化、基因克隆及表达

• 作者: 刘珠果 张龙霄 戴秋云 郑兴
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 石头鱼 毒素 NeoVTX cDNA序列 重组蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 345-348,376
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4047字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.03.009

摘要

目的:分离并鉴定石头鱼粗毒液毒性成分,克隆其序列并进行原核表达.方法:利用SDS-PAGE及凝胶过滤HPLC分离石头鱼粗毒液,质谱鉴定其序列;利用RACE技术钓取毒素基因;将获得的毒素cDNA连入pET-22b(+)载体,转化宿主细胞大肠杆菌,经IPTG诱导表达,用亲和层析纯化目的蛋白.结果:从石头鱼粗毒液中分离到NeoVTX等多种蛋白质,克隆了NeoVTXα和β亚基的cDNA序列,获得了纯度为95％以上的重组α亚基蛋白.结论:中国南海石头鱼粗毒液的主要成分为NeoVTX,其α、β亚基序列与日本冲绳海域石头鱼NeoVTX的α和β亚基具有很高的同源性;大肠杆菌菌株可稳定表达α亚基.该工作为NeoVTX抗体制备奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑兴	南华大学药物药理研究所	64	351	11.0	15.0
2	刘珠果	军事医学科学院生物工程研究所	25	74	5.0	6.0
3	戴秋云	军事医学科学院生物工程研究所	61	242	9.0	11.0
4	张龙霄	南华大学药物药理研究所	1	5	1.0	1.0