神经肽Y对猪小肠上皮细胞NaPi-Ⅱb蛋白表达及无机磷吸收的影响

• 作者: 方热军 胡龙昌
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 神经肽Y 磷 小肠上皮细胞 Ⅱb型钠磷转运蛋白 吸收
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 页码范围: 1640-1647
• 页数: 8页
• 分类号: S828|S816.2
• 字数: 5717字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.10.009

摘要

本试验通过猪小肠上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IEC)的体外培养,旨在从细胞水平、基因转录和蛋白表达3个层面探讨不同浓度神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)对猪IEC中Ⅱb型钠磷转运蛋白(Sodium dependent phosphate cotransporterⅡb,NaPi-Ⅱb)的表达及无机磷(Inorganic phosphorus,Pi)吸收的影响,阐释NPY调控Pi吸收的机理,为深入研究动物小肠Pi吸收的分子机制和调控通路提供试验依据.试验设有6个处理,对照组未加NPY,其他处理组添加不同浓度的NPY(10 11、10 10、10 9、10 8和10 7 mol·L 1),每个处理设有6～～8个重复,通过噻唑蓝(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)比色法检测小肠上皮细胞的增殖情况;通过磷检测试剂盒,采用磷钼酸法测定细胞上清液Pi含量的变化;利用荧光定量PCR技术检测IEC中NaPi-Ⅱb mRNA的相对表达量,采用蛋白质免疫印迹(Western blotting)技术检测NaPi-Ⅱb蛋白的相对表达水平.结果表明:用不同浓度的NPY刺激IEC 24 h后,各处理组细胞增殖无显著性差异(P＞0.05).细胞上清液中Pi含量随时间呈显著线性(P＜0.01)和二次曲线(P＜0.01)下降;在干预24 h后,各处理组细胞上清液中Pi含量组间呈现显著性差异(P＜0.01),与对照组相比,10 10、10 9、10 8和10 7 mol·L 1处理组上清液Pi含量呈显著性下降(P＜0.01),IEC对Pi的吸收量分别提高了161％、171％、168％和139％.NPY添加浓度与NaPi-Ⅱb mRNA和NaPi-Ⅱb蛋白的相对表达量均呈二次曲线关系(P＜0.01,P＜0.05).适宜浓度的NPY可以通过刺激小肠上皮细胞NaPi-Ⅱb mRNA的表达,使NaPi-Ⅱb蛋白表达增多,进而诱导细胞外液中无机磷跨膜转运到细胞内液,促进小肠上皮细胞对无机磷的吸收;培养液中NPY的最佳浓度为10 10～10 8 mol·L 1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方热军	湖南农业大学动物科技学院	214	1044	16.0	23.0
2	胡龙昌	湖南农业大学动物科技学院	3	14	2.0	3.0