口蹄疫病毒表位嵌合蛋白在枯草芽胞杆菌中的分泌表达

• 作者: 任晓冰 冉多良 窦小龙 苗书魁 马文戈 魏婕
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 表位嵌合蛋白 猪圆环病毒2型 枯草芽胞杆菌
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 页码范围: 287-292
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文

摘要

为了将口蹄疫病毒(FMDV)中和表位展示在病毒样颗粒(VLP)表面,以猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白为骨架,用FMDV O/Mya-98/2010毒株G-H环替换PCV2自身中和表位,构建嵌合衣壳蛋白CaO.为分泌表达CaO蛋白,在芽胞杆菌穿梭质粒pHCMC05的多克隆位点中顺次插入枯草芽胞杆菌P43启动子和中性蛋白酶B分泌信号肽(nprBsp),构建分泌型大肠杆菌-枯草芽胞杆菌穿梭质粒p7257-P43.然后将合成的CaO基因插入p7257-P43质粒nprBsp的下游,构建分泌表达质粒p7257-P43-CaO.将该质粒转化枯草芽胞杆菌WB800,氯霉素诱导表达.上清经SDS-PAGE检测,嵌合蛋白CaO在枯草芽胞杆菌中得到表达.Western-blot证实,该蛋白具有反应原性.免疫电镜可观察到直径约15 nm±2 nm的VLP,表明嵌合蛋白在体外能有效组装.