人FoxA1 shRNA载体构建与检测

• 作者: 张蔚林 文俏程 曹小霞 肖献忠 谭思创 谭斯品 陈子华 陈志康
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: FoxA1 shRNA载体 干扰效率
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: R735.2
• 字数: 3847字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建有效的针对人FoxA1基因的shRNA干扰载体,并验证其干扰效果.方法 设计合成3对针对人FoxA1基因的和1对无同源性的shRNA片段,将合成的shRNA片段插入到干扰载体pRNAT-U6.1/Neo中,经过酶切和测序验证,成功构建人FoxA1基因的shRNA和空白对照载体.将各干扰载体和空白载体转染人正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(SGC-7901),Realtime RT-PCR和Western-blotting检测干扰载体的干扰效率.结果 ①酶切和测序验证均表明各shRNA载体构建成功.将空载体及各干扰载体分别转染人正常胃黏膜细胞(GES-1)和胃癌细胞(SGC-7901)发现,和空白对照组相比,3组干扰载体能够从mRNA和蛋白表达水平明显抑制FoxA1的表达,但是3组质粒的抑制效率有一定的差异,以3号质粒对Foxa1的干扰效率最强.结论 成功构建了三个有效的针对人FoxA1基因的shRNA干扰载体,三组质粒都能有效地抑制FoxA1在GES-1细胞和SGC-7901细胞中的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖献忠	中南大学湘雅医学院基础医学院病理生理学系	130	772	14.0	18.0
2	谭思创	中南大学湘雅二医院心胸外科	9	30	3.0	5.0
3	陈子华	中南大学湘雅医院普外科	57	430	12.0	18.0
4	陈志康	中南大学湘雅医院普外科	41	370	10.0	18.0
5	文俏程	中南大学湘雅医院普外科	6	34	2.0	5.0
6	张蔚林	中南大学湘雅医院普外科	1	0	0.0	0.0
7	曹小霞	中南大学湘雅医学院基础医学院病理生理学系	1	0	0.0	0.0