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摘要:
日本脑炎是一种由日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)引起的、经虫媒传播并可导致母猪流产的急性病毒性传染病.JEV的M蛋白参与病毒的感染过程且能诱生具有轻度中和作用的抗体.本研究提取JEV上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,RT-PCR扩增该病毒的prM基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28 (a)上,构建重组原核表达质粒pET-28 (a)-JEV-prM,转化大肠杆菌BL21 (DE3)菌株,IPTG诱导表达重组his-JEV-prM蛋白,SDS-PAGE结果表明,获得分子量大小为24 ku的重组蛋白,主要以包涵体形式表达,薄层扫描分析表明,表达量占总菌体蛋白的30%以上,纯化后获得高纯度重组蛋白,占总蛋白比例达60%以上.纯化蛋白his-JEV-prM免疫BALB/c小鼠,制备了小鼠抗JEV-prM抗体,Westemblotting和间接免疫荧光检测小鼠抗JEV-M抗体的特异性.纯化蛋白能诱导小鼠产生高滴度抗体,并且该抗体能特异识别原核、真核和病毒表达的prM.本研究表达纯化的prM蛋白和小鼠抗prM抗体,为基于M蛋白的疫苗开发、检测JEV的方法及致病机理研究提供了工具.
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文献信息
篇名 日本脑炎病毒prM蛋白的表达及免疫原性分析
来源期刊 畜牧与兽医 学科 农学
关键词 日本脑炎病毒 prM 原核表达 免疫原性
年,卷(期) 2014,(9) 所属期刊栏目 兽医科技
研究方向 页码范围 76-80
页数 5页 分类号 S852.65
字数 4572字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王晓杜 浙江农林大学动物科技学院 20 68 4.0 7.0
2 韩秀杰 浙江农林大学动物科技学院 4 8 2.0 2.0
3 赵凡凡 浙江农林大学动物科技学院 6 16 3.0 3.0
4 梅匀安 浙江农林大学动物科技学院 3 10 2.0 3.0
5 袁庄川 浙江农林大学动物科技学院 3 10 2.0 3.0
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研究主题发展历程
节点文献
日本脑炎病毒
prM
原核表达
免疫原性
研究起点
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研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
畜牧与兽医
月刊
0529-5130
32-1192/S
大16开
南京卫岗1号南京农业大学内
28-42
1950
chi
出版文献量(篇)
9512
总下载数(次)
18
总被引数(次)
39872
相关基金
浙江省自然科学基金
英文译名:
官方网址:http://www.zjnsf.net/
项目类型:一般项目
学科类型:
论文1v1指导