昆明鼠肠激酶轻链的原核表达、复性与纯化

• 作者: 李黄金 杨梦琳 蔡洪敏 陈展歌 陈锡贤
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 鼠肠激酶 表达 复性 纯化
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 48-51
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2014.01.0013

摘要

目的:构建昆明小鼠十二指肠肠激酶轻链(mEKL)大肠杆菌高效表达系统,并建立复性与纯化方法.方法:RT-PCR法扩增mEKL全长cDNA,以融合表达载体pET32a克隆于大肠杆菌BL21(DE3)和Origami(DE3),采用阴离子交换层析纯化复性表达产物,经牛肠激酶消化回收mEKL.结果:扩增得到723bp的mEKL全长cDNA,经序列分析发现,昆明鼠来源的mEKL cDNA序列的Ser131密码子中存在1个同义点突变.mEKL在2种宿主菌中的表达产物均为包涵体蛋白,经稀释复性、阴离子交换层析纯化和肠激酶切割可得高纯度mEKL.结论:成功构建昆明鼠源mEKL高效表达工程菌,并建立相应的纯化方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李黄金		13	8	2.0	2.0
2	陈展歌		2	3	1.0	1.0
3	陈锡贤		1	0	0.0	0.0
4	杨梦琳		1	0	0.0	0.0
5	蔡洪敏		2	0	0.0	0.0