重组新疆出血热病毒S和M基因疫苗诱导小鼠免疫应答的评价

• 作者: 刘东亮 彭倩 李轶杰 李阳 杨建华 武勇凯 汪梅芳 王咏星 马洁
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 新疆出血热病毒 基因免疫 基因疫苗
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 403-406
• 分类号: R512.8|R392.7
• 语种: 中文

摘要

目的 选取新疆出血热病毒M基因(编码糖蛋白Gn,Gc)和S基因(编码核蛋白NP)部分基因片段,并进行部分片段的嵌合,分别插入至真核表达载体PVAX1中构建重组质粒,并将重组质粒分别免疫小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答的效果.方法 将NP(aa1 ～ 482)、NP2(aa170 ～ 305)和糖蛋白Gn(aa529 ～820)、Gc(aa1050～1697)片段,及Gc-NP2片段分别构建到真核表达载体PVAX1上构建重组质粒,用重组质粒免疫小鼠,通过T细胞增殖试验,细胞因子含量测定和ELISA对免疫效果进行评价.结果 经双酶切鉴定和DNA测序证实重组质粒构建正确.pVAX1-NP2实验组小鼠的血清抗体效价可以达到1∶6 400,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显,两组的IFN-γ的表达水平也高达(865.15±6.29)pg/mL及(1727.21±33.93) pg/mL,与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.01).pVAX1-NP2及pVAX1-Gn实验组IL-4的表达水平为(19.11±1.20) pg/mL和(20.07±1.67)pg/mL,都显著高于对照组的(9.35±1.82)pg/mL(P＜0.05).结论 成功构建了多个重组真核表达载体,免疫小鼠后获得了效价高,特异性好的抗体.各重组质粒都激起了较强的体液免疫及细胞免疫,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组效果最好,可将其作为新疆出血热病毒的候选疫苗.