籽粒苋 AhNAD-ME 的序列特征与表达

• 作者: 冯瑞云 张忠梁 张维锋 张耀 李平 白云凤 聂江婷 闫建俊
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 籽粒苋 AhNAD-ME 序列特征 表达模式 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 耕作栽培?生理生化
• 页码范围: 2192-2197
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2014.02192

摘要

NAD(P)-苹果酸酶催化苹果酸氧化脱羧,产生丙酮酸和 CO2,伴随 NAD(P)的还原。在 C4植物中,苹果酸酶参与了 C4光合作用。本研究对克隆的双子叶 C4植物籽粒苋 NAD-苹果酸酶基因(AhNAD-ME)编码的氨基酸序列进行了生物信息学分析,结果表明, AhNAD-ME 具有苹果酸酶的完整功能域,包括苹果酸 N 端结构域和苹果酸酶的 NAD结合结构域；进化树表明,该序列属于 NAD-ME 的α亚基,该亚基定位于线粒体基质中。半定量 RT-PCR 分析表明,该基因主要在叶片和茎中表达,表达量随光照时间延长而增加。将 AhNAD-ME 基因重组到原核表达载体 pEASY-E1中,电击法转化到大肠杆菌 Transette (DE3)菌株中, IPTG 诱导其高效表达,表达的融合蛋白的分子量与预期相符,主要以包涵体形式存在。