中华蜜蜂囊状幼虫病毒北京分离株VP1蛋白基因序列特征及原核表达

• 作者: Abebe Jenberie WUBIE 周婷 国占宝 徐书法 李薇 薛菲 黄家兴
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 中华蜜蜂 囊状幼虫病毒 VP1蛋白 系统进化 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 简报
• 页码范围: 495-502
• 分类号: Q965.8
• 语种: 中文

摘要

[目的]研究中华蜜蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV) VP1蛋白的分子进化特征及遗传多样性.[方法]利用RT-PCR方法,克隆了8株CSBV北京分离株VP1蛋白的基因编码区.[结果]序列分析表明,VP1蛋白基因编码区开放阅读框长945 bp,编码315个氨基酸,推测编码蛋白的相对分子量和等电点分别为35.42 kDa和9.23,具有亲水性和免疫原性.序列同源性分析表明,不同年份CSBV北京分离株VP1蛋白氨基酸序列间差异较小,仅个别氨基酸存在差异.北京分离株与辽宁分离株及越南分离株VP1核苷酸序列一致性达93％,与印度及韩国分离株VP1核苷酸序列一致性达92％,与英国分离株VP1核苷酸序列一致性最低,为88％.序列分析同时表明,CSBV北京分离株VP1蛋白序列存在特有的序列特征,同其他地区分离株比较,北京分离株VP1蛋白序列中存在着氨基酸的插入突变.序列替换率分析表明,亚洲型分离株间序列替换率低于亚洲分离株与欧洲分离株间的替换率.构建原核表达载体pEASY-E1-VP1,经IPTG诱导,CSBV VP1蛋白在大肠杆菌Escherichia coii BL21(DE3)pLysS菌株中表达.[结论]本研究提示CSBV不同分离株基因序列存在变异,结果为进一步研究CSBV致病性分化的分子机理奠定了基础.