小麦3-磷酸-甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)上游序列的克隆及功能验证

• 作者: 张琳 杨淑慎 邓荣 邓西平 陈鹏 马兰兰
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 小麦 GAPDH启动子 瞬时表达 功能分析
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 973-982
• 页数: 10页
• 字数: 8284字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.08.007

摘要

3-磷酸-甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)广泛地存在于各种生物体内,是生物体内糖异生和糖酵解过程中的关键酶.为了获取长武134小麦(Triticum aestivum L.)GAPDH上游序列并分析其启动子活性,本研究根据小麦GAPDH基因(GenBank登录号:EF592180.1)5'端序列设计特异引物,利用基因组步移法获得了该基因上游1 071 bp的序列;对该序列进行结构分析表明,转录起始位点可能位于起始密码子上游约700 bp处;PlantCARE预测瞬时作用元件表明,在翻译起始密码子ATG的上游含有启动子基本结构元件TATA-box、CAAT框,以及能够应答脱落酸(abscisic acid,ABA)、干旱、低温等非生物胁迫逆境因子的多种顺式作用元件(如MYB、MYC、WRKY、ABRE、HSE和GT-1等);然后用GAPDH基因启动子序列替换植物表达载体pBI121 GUS基因前的CaMV 35S启动子,并构建启动子融合表达载体,并通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA 105介导转化烟草(Nicotiana tabacum)叶盘进行了瞬时表达分析,以GUS作为报告基因研究在ABA、干旱、低温3种非生物胁迫下启动子的活性.结果显示,ABA、低温和干旱对启动子有较明显的诱导效应,其中以干旱诱导最为显著.本研究通过基因组步移克隆得到GAPDH基因的启动子,分析表明此启动子为有着强启动活性的诱导型启动子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨淑慎	西北农林科技大学生命科学学院	46	699	11.0	25.0
2	陈鹏	西北农林科技大学生命科学学院	65	668	14.0	23.0
3	邓西平	西北农林科技大学生命科学学院	13	58	5.0	7.0
4	张琳	西北农林科技大学生命科学学院	9	38	5.0	6.0
5	邓荣	西北农林科技大学生命科学学院	2	36	2.0	2.0
6	马兰兰	西北农林科技大学生命科学学院	3	31	3.0	3.0