绿原酸人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

• 作者: 孙晔 屈会化 张越 王庆国 王雪茜 续洁琨 薛瑾 赵琰
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 绿原酸 人工抗原 多克隆抗体 碳二亚胺法 免疫分析
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 药剂与工艺
• 页码范围: 480-484
• 分类号: R284.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.04.006

摘要

目的 合成绿原酸(chlorogenic acid,CHA)人工抗原,制备CHA多克隆抗体,为制备过敏成分分析的免疫芯片奠定基础.方法 采用碳二亚胺法分别合成CHA免疫抗原(CHA-牛血清白蛋白)和包被抗原(CHA-卵清蛋白);UV法和TLC法鉴定人工抗原偶联是否成功;间接ELISA方法检测免疫小鼠血清中抗体效价;间接竞争ELISA方法检测抗体特异性.结果 经UV法和TLC法检测,CHA与BSA偶联成功.血清抗体效价为1:128 000,CHA-PAbs的质量浓度与抑制率的线性方程为Y=-0.10 lnX+ 1.158,线性检测范围为15.6～250 ng/mL,R2=0.995,并且和甘草酸、黄芩苷等与其常配伍应用的中药化合物均无交叉反应.结论 成功制备了灵敏度高、特应性好的CHA多克隆抗体,为CHA的微量检测和过敏性研究提供了实验依据.