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摘要:
目的 探讨微小RNA-21对缺血缺氧所致大鼠心肌细胞凋亡的影响,并分析其可能的作用机制. 方法 (1)取大鼠心肌细胞株H9C2加入低糖无血清DMEM培养液模拟缺血环境,将细胞置于气体成分为体积分数1%氧气、5%二氧化碳和94%氮气的三气培养箱中进行缺氧培养.实时荧光定量RT-PCR检测正常心肌细胞和缺血缺氧刺激6、24 h心肌细胞中微小RNA-21的表达.(2)另取心肌细胞株H9C2按随机数字表法分为4组.正常对照组:不进行任何处理,常规培养;单纯缺血缺氧组:行单纯缺血缺氧处理24 h;阴性转染+缺血缺氧组:转染微小RNA模拟物阴性对照24 h后,给予缺血缺氧处理24 h;微小RNA-21+缺血缺氧组:转染微小RNA-21模拟物24 h后,给予缺血缺氧处理24 h.后3组均于处理完毕后立即进行如下检测,正常对照组于同时相点收集细胞进行检测.流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;实时荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别测定心肌细胞程序性细胞死亡因子4 (PDCD4)的mRNA和蛋白表达水平.本实验样本数为6或3.对数据行单因素方差分析和LSD-t检验. 结果 (1)正常心肌细胞和缺血缺氧刺激6、24 h心肌细胞微小RNA-21的相对表达量分别为1.09 ±0.17、0.75 ±0.08、0.67 ±0.08(F=11.280,P=0.009).与正常心肌细胞比较,缺血缺氧处理24(t=4.461,P=0.004)、6 h(t=3.642,P=0.011)的心肌细胞中微小RNA-21表达均下调,且前者更明显.故后续实验细胞缺血缺氧处理均为24 h.(2)正常对照组心肌细胞凋亡率为(3.5±0.7)%.缺血缺氧处理24 h,单纯缺血缺氧组、阴性转染+缺血缺氧组及微小RNA-21+缺血缺氧组心肌细胞凋亡率分别为(17.3±3.2)%、(16.4±3.0)%、(7.6±2.0)%(F=15.176,P=0.001).与正常对照组比较,单纯缺血缺氧组心肌细胞凋亡率明显升高(t=5.641,P <0.001);与阴性转染+缺血缺氧组比较,微小RNA-21+缺血缺氧组心肌细胞凋亡率明显下降(t=3.588,P=0.007).正常对照组心肌细胞PDCD4的mRNA相对表达量为1.06 ±0.21.缺血缺氧处理24 h,单纯缺血缺氧组、阴性转染+缺血缺氧组及微小RNA-21+缺血缺氧组PDCD4的mRNA相对表达量分别为3.01 ±0.34、3.05 ±0.25、1.48±0.24(F=44.952,P<0.001).与正常对照组比较,单纯缺血缺氧组PDCD4的mRNA表达明显上调(t=8.945,P<0.001);与阴性转染+缺血缺氧组比较,微小RNA-21+缺血缺氧组PDCD4的mRNA表达明显降低(t=7.253,P<0.001).正常对照组PDCD4的蛋白相对表达量为0.44 ±0.08.缺血缺氧处理24 h,单纯缺血缺氧组、阴性转染+缺Ⅱ血缺氧组及微小RNA-21+缺血缺氧组PDCD4的蛋白相对表达量分别为0.96 ±0.13、1.05 ±0.12、0.58 ±0.12(F=18.804,P=0.008).与正常对照组比较,单纯缺血缺氧组PDCD4的蛋白表达明显上调(t =5.429,P=0.006);与阴性转染+缺血缺氧组比较,微小RNA-21+缺血缺氧组PDCD4的蛋白表达明显降低(t=4.903,P=0.008). 结论 缺血缺氧刺激使心肌细胞微小RNA-21水平降低,提高细胞微小RNA-21水平可减轻缺血缺氧所致心肌细胞凋亡,其抗凋亡作用可能是通过降低细胞PDCD4表达而实现的.
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缺血后处理
内容分析
关键词云
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文献信息
篇名 微小RNA-21对缺血缺氧大鼠心肌细胞凋亡的影响
来源期刊 中华烧伤杂志 学科
关键词 心肌缺血 细胞系 细胞凋亡 微小RNA-21 程序性细胞死亡因子4
年,卷(期) 2014,(2) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 153-157
页数 5页 分类号
字数 4189字 语种 中文
DOI 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2014.02.014
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 杨飞 武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院烧伤研究所 41 293 10.0 15.0
2 谢卫国 武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院烧伤研究所 60 241 9.0 12.0
3 叶子青 武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院烧伤研究所 13 32 3.0 5.0
4 赵超莉 武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院烧伤研究所 12 37 4.0 5.0
5 阮琼芳 武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院烧伤研究所 14 25 3.0 4.0
6 谢琼慧 武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院烧伤研究所 7 19 3.0 4.0
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心肌缺血
细胞系
细胞凋亡
微小RNA-21
程序性细胞死亡因子4
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50-1120/R
大16开
重庆市沙坪坝区高滩岩正街
78-131
1985
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