粘类小麦雄性不育系线粒体DNA的AFLP标记及SCAR转化

• 作者: 于永昂 巨岚 张姣 张改生 朱启迪 牛娜 王军卫 翁群珠 马守才
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 小麦 粘类细胞质雄性不育 同核异质 线粒体DNA SCAR标记
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 958-965
• 页数: 8页
• 字数: 5474字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.08.005

摘要

为了能在分子水平上有效鉴定具有粘果山羊草(Aegilops kotschyi)、偏凸山羊草(A.ventricosa)、普通小麦变种斯卑尔脱(Triticum spelta)细胞质雄性不育系及其保持系90-110和8222,提高其在杂交小麦(Triticum aestivum L.)研究与应用中的定向遗传改良,本研究对其线粒体DNA进行了扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)标记和序列特征性片段扩增区域(sequence characterized amplified region,SCAR)标记.通过AFLP标记方法,应用64对引物组合EcoR Ⅰ-NNN/MseⅠ-NNN对小麦同核异质雄性不育系和保持系进行扩增,共扩增出682条带,其中113条为多态性条带.引物E-AGG/M-CTA组合在粘果山羊草细胞质雄性不育系中扩增出一条大小约300 bp的特异性条带,对该特异条带进行回收、测序,利用Primer Premier 5.0软件重新设计SCAR引物,并对这3种类型同核异质小麦细胞质雄性不育系和保持系进行扩增,其中引物YW1在3种细胞质雄性不育系和保持系中都扩增出条带,而引物YW2仅在粘果山羊草细胞质雄性不育系扩增出一条198 bp的特异性片段,结果表明,己成功地将AFLP标记转化为操作简便、表现稳定的SCAR标记.此片段与小麦线粒体基因组有很高的同源性(同源性为99％),为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶基因(GenBank登录号:EU534409.1)上的序列,该酶是线粒体中氧化磷酸化的入口酶,与小麦细胞质雄性不育密切相关.本研究可以用于粘类小麦细胞质雄性不育系分子标记辅助育种,也为小麦细胞质种性鉴定提供了技术支撑和理论依据.