人巨细胞病毒即刻早期基因功能研究

• 作者: 李文静 赵媛 韦苇 顾绍庆 马晓蒙
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 即刻早期基因 干扰RNA 基因表达
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 44-48
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3942字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)在体外增殖过程中即刻早期(immediately early,IE)基因的作用.方法 设计并化学合成3条靶向IE基因外显子序列的siRNA,应用阳离子脂质体法将干扰序列转染入人胚肺成纤维(human embryonic lung fibroblast,HELF)细胞,用HCMV感染已转染入siRNA的细胞,同时设置正常对照组、阴性对照组、阳性对照组和转染试剂对照组.采用流式细胞术检测转染效果,荧光定量PCR和琼脂糖凝胶电泳方法检测分析导入的siRNA对IE基因和GAPDH阳性对照基因的抑制效果以及早期(E)基因和晚期(L)基因的表达情况.结果 siRNA成功导入HELF细胞内,6孔板内5μl脂质体可导入的最佳siRNA量约为100pmol,阳性对照组GAPDH表达量较其他对照组有明显的下降(P＜0.05),抑制率为70.8％;干扰组中3条siRNA对IE基因的表达均有抑制作用.IE基因表达下调后,E基因和L基因的表达较对照组也有明显下降(P＜0.05).结论 在体外,靶向IE基因的siRNA能有效抑制IE基因的表达从而影响E基因和L基因的表达,表明IE基因的有效表达是E基因和L基因表达的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马晓蒙	江苏大学临床医学院	4	3	1.0	1.0
2	顾绍庆	镇江市第一人民医院儿科	4	6	1.0	2.0
3	李文静	江苏大学临床医学院	7	36	4.0	6.0
4	韦苇	江苏大学临床医学院	4	2	1.0	1.0
5	赵媛	江苏大学临床医学院	5	3	1.0	1.0