大鳞副泥鳅β-actin 基因近端启动子的克隆及启动活性分析

• 作者: 俞钦明 先友成进 徐琪 李相赫 童一宇 陈国宏
• 来源期刊: 淡水渔业
• 学科: 农学
• 关键词: 大鳞副泥鳅( Paramisgurnus dabryanus) β-actin 启动子 绿色荧光蛋白 显微注射
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 18-24
• 页数: 7页
• 分类号: S917.4
• 字数: 3966字
• 语种: 中文

摘要

采用PCR 技术从大鳞副泥鳅（ Paramisgurnus dabryanus ）基因组中克隆了β-actin 基因近端启动子片段DPRK1，并将该基因启动子片段DPRK1定向亚克隆到不含启动子的绿色荧光表达载体pEGFP-N1中，构建了重组荧光表达载体pDPRK1-EGFP。将该载体分别转染真核细胞293T、 CEL及DF1，检测绿色荧光表达情况。重组载体经NdeⅠ酶切线性化后，显微注射到斑马鱼（ Danio rerio）的受精卵中。序列分析显示该片段的长度为1282 bp，含167 bp的5′侧翼序列近端启动子区和共1115 bp的第1个外显子以及第1个内含子区。5′侧翼序列近端启动子含有CAAT box， CArG motif和TATA box，分别位于转录起始位点（＋1）上游的-94、-64和-31处。在将重组载体pDPRK1-EGFP转染293 T、 CEL及DF1的实验中观察到3种细胞都有很强的绿色荧光，在显微注射到斑马鱼受精卵的实验中也观察到绿色荧光，该结果表明大鳞副泥鳅β-actin基因近端启动子片段DPRK1具有效的启动功能，为下一步创制转基因泥鳅新品系提供了技术支撑。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈国宏	扬州大学动物科学与技术学院	393	3876	28.0	46.0
2	徐琪	扬州大学动物科学与技术学院	178	1010	15.0	26.0
3	俞钦明	扬州大学动物科学与技术学院	1	1	1.0	1.0
4	童一宇	扬州大学动物科学与技术学院	3	4	1.0	2.0