应用Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4测定H2O2诱导的A549细胞凋亡过程中的[Ca2+]i变化

• 作者: 崔泽实 张四洋 李春艳 邱雪杉 高建
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 关键词: Fluo-3 Fluo-4 Ca2+ H2O2 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 197-202
• 页数: 6页
• 字数: 4210字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3779/j.issn.1009-3419.2014.03.03

摘要

背景与目的肺癌是世界范围内常见的恶性肿瘤，Ca2+对于肿瘤细胞凋亡有重要的调控作用。实时监测肺癌细胞内Ca2+水平，有助于深入研究Ca2+介导肺癌细胞凋亡的分子机制。本研究旨在观察Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4在H2O2诱导的A549细胞凋亡过程中的应用，实时测定胞浆Ca2+浓度（[Ca2+]i），探讨[Ca2+]i与细胞凋亡的关系，并比较两种Ca2+探针在荧光强度及[Ca2+]i测定值方面的差异。方法采用Ca2+荧光探针fluo-3和fluo-4负载细胞，1 h后用不同浓度的H2O2刺激细胞，激光扫描共聚焦显微镜实时测定选取细胞的[Ca2+]i变化。采用DAPI染色试剂盒观察H2O2刺激后细胞凋亡情况。结果在相同的探针浓度、负载时间和相同的图像采集参数的条件下，选定细胞内fluo-4平均荧光强度高于fluo-3。50 mM H2O2刺激后，A549细胞胞浆内[Ca2+]i迅速升高，通过公式计算发现采用fluo-3探针负载的选定细胞中[Ca2+]i变化范围是112.2 nM-1,069.6 nM，采用lfuo-4探针负载的选定细胞中[Ca2+]i变化范围是7.6 nM-505.4 nM。同时发现经H2O2刺激后，凋亡细胞百分比明显增加（P<0.01）。结论H2O2促进A549细胞内Ca2+释放，诱导细胞凋亡。Ca2+探针lfuo-4可能更适合于监测含量较低的细胞中[Ca2+]i变化。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高建	中国医科大学实验技术中心	21	90	6.0	8.0
2	张四洋	中国医科大学实验技术中心	15	54	4.0	7.0
3	崔泽实	中国医科大学实验技术中心	94	470	11.0	15.0
4	李春艳	中国医科大学实验技术中心	15	66	5.0	7.0
5	邱雪杉		1	9	1.0	1.0