绒山羊皮肤蛋白双向电泳条件的优化与常见问题分析

• 作者: 刘志红 奈日乐 张燕军 李金泉 杜琛 杜立新 王志新 高丽霞
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 绒山羊 皮肤 蛋白质组 双向电泳 分析
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 249-256
• 页数: 8页
• 字数: 6583字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.02.015

摘要

为建立和优化绒山羊(Capra cashmere)皮肤组织蛋白质双向电泳技术(2-DE),本研究从样品提取及纯化方法、上样量、IPG胶条的选择、等电聚焦程序等多个方面对双向电泳分离条件进行比较研究.结果显示,液氮研磨+超声波破碎法提取皮肤组织蛋白质,2-D clean up kit试剂盒进行纯化,采用17 cm pH4～7的IPG胶条450 μg上样量,等电聚焦程序重复数次除盐步骤,获得的2-DE图谱效果较好;同时对实验中遇到的常见问题进行了讨论分析.结果表明,通过优化的双向电泳条件,建立了较高分辨率和较好重复性的绒山羊皮肤组织双向电泳图谱,可以进行后续实验.本研究获得良好的绒山羊皮肤组织蛋白双向电泳图谱,验证了绒山羊蛋白质组学研究的可行性,为后续进行绒山羊皮肤毛囊发育周期蛋白质组学研究、揭示毛囊发生发育规律提供了重要的技术资料.