eha基因对迟缓爱德华菌抵抗巨噬细胞内外压力的影响

• 作者: 刁亦非 周佳莹 张坡 徐泽炎 成静 李佳盈 李玉红 盛安康 祝如愿 郑恩金 陆承平 高大庆
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: eha基因 巨噬细胞 迟缓爱德华菌
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 295-299
• 页数: 5页
• 分类号: R378.2
• 字数: 1999字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2014.03.016

摘要

目的 E.tarda 能够在体内外许多环境包括在巨噬细胞内生存和繁殖,eha基因是该菌一个重要的转录调控基因,本研究探讨该基因在细菌抵抗巨噬细胞内外压力中的作用及机制.方法 采用体外实验模拟巨噬细胞内氧化和酸杀菌条件、体内血清和胆汁杀菌条件、以及细菌对SDS和多粘菌素B敏感性试验,比较ET-13毒力株及其Δeha缺失株和ehaComp互补株在这些压力下存活率,利用RT-PCR和SDS-PAGE电泳,比较上述3种细菌相关基因的转录和表达的差异.结果 eha基因的缺失使ET-13对酸、H2O2、SDS和多粘菌素B 敏感性提高(P<0.05);经小鼠血清或鱼胆汁处理后,3种菌株的存活率没有明显区别(P >0.05);RT-PCR结果显示,eha基因的缺失使得E.tarda内的超氧化物歧化酶基因sodC、过氧化氢酶基因katB和鞭毛蛋白基因fliC、Ⅲ型分泌系统分泌蛋白基因eseC的转录水平下降.SDS-PAGE电泳结果显示,缺失株的主要外膜蛋白比野生株表达降低.结论 eha 基因通过调控E.tarda相关基因的表达,参与了该菌抵抗巨噬细胞内氧化和酸等的压力,有助于细菌在巨噬细胞内生存和繁殖.