刀额新对虾原代淋巴细胞培养及其感染白斑综合征病毒(WSSV)的病理特征

• 作者: 国子娟 廖梅杰 王印庚 荣小军 郭华荣 韩倩
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 刀额新对虾 白斑综合征病毒(WSSV) 淋巴组织 原代细胞培养 感染 病理
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 页码范围: 584-592
• 分类号: S941.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49026

摘要

为深入了解对虾白斑综合征病毒(WSSV)的致病机理和体外培养的对虾细胞对WSSV的敏感性,实验以1.5 ×L-15培养基培养刀额新对虾原代淋巴细胞,待细胞形成单层后接种WSSV,通过倒置显微镜、荧光显微镜、透射电子显微镜观察接种病毒后细胞的病理变化.结果显示,使用1.5 ×L-15培养基培养对虾淋巴组织,3h后可观察到有细胞迁出,并能迅速形成单层,36 h后细胞的迁出汇合率可达80％,且能存活20 d以上.接种WSSV 24 h后,出现病变的细胞变圆、漂浮,细胞之间的网状结构消失,最后细胞破碎、溶解;接种WSSV 48 h后Hoechst 33342染色结果显示,感染的细胞核深染,且变形、膨大;电镜下,细胞核内含大量成簇分布的杆状病毒,细胞器被挤向细胞边缘,细胞膜轮廓模糊.研究表明,纯化的病毒粒子接种体外培养的淋巴细胞,能够使其产生明显病理变化,证明了WSSV对体外培养的淋巴细胞具有感染力,并且可在淋巴细胞中增殖.