结核分枝杆菌Hsp 16.3表达与感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡的关系

• 作者: 刘丹霞 刘云霞 吴芳 庹清章 张万江 李微 田玺择 章乐 董伟杰 董江涛
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 结核分枝杆菌 Hsp16.3 肺泡巨噬细胞 凋亡 Caspase-3 Bcl-2
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 300-305
• 页数: 6页
• 分类号: R378.911
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201403004

摘要

目的：探讨结核分枝杆菌(MTB)小分子热休克蛋白 Hsp16.3表达与感染小鼠肺泡巨噬细胞凋亡的关系。方法分别将 MTB 国际标准强毒株 H37Rv 株 Hsp16.3基因缺失突变菌株(△H37Rv)、结核杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株(H37Rv)以及无菌生理盐水溶液(空白对照)通过小鼠尾静脉注入小鼠体内以建立小鼠的感染模型,并在感染后的1、3、5、7、9、11、13、15 d分离及鉴定小鼠肺泡巨噬细胞,用激光共聚焦显微镜技术检测及鉴定 MTB感染小鼠肺泡巨噬细胞；流式细胞术检测不同时间点感染小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡率；Western blot 技术检测小鼠肺泡巨噬细胞内半胱天冬酶-3(Caspase-3)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白的表达。结果△H37Rv 菌株感染组和 H37Rv菌株感染组凋亡率均高于空白对照组,△H37Rv组的巨噬细胞凋亡率在感染1~7 d内逐渐升高,至感染7 d时达到高峰,随后呈下降趋势,与 H37Rv组相比,1~7 d及13~15 d,△H37Rv组的巨噬细胞凋亡率高于 H37Rv组,差异有统计学意义(P<0.05)；H37Rv组和△H37Rv 组的巨噬细胞 Caspase-3和 Bcl-2蛋白表达水平均高于空白对照组；1~7 d内,H37Rv感染组和△H37Rv感染组的巨噬细胞Caspase-3表达水平逐渐升高,至第7天达到高峰,且△H37Rv 感染组在第13天时出现第二次高峰,但Caspase-3表达水平均高于 H37Rv 感染组,差异有统计学意义(P<0.05)；在感染的早期(1~7 d),△H37Rv感染组Bcl-2的表达水平无明显变化(P<0.05),但在9 d后逐渐升高；H37Rv感染组巨噬细胞内Bcl-2的表达水平1~7 d内无明显变化(P<0.05),7 d 后逐渐升高,但△H37Rv 感染组 Bcl-2的表达水平始终低于 H37Rv组且7 d后表现更为显著。结论在 MTB感染的早期和晚期,MTB小分子热休克蛋白 Hsp16.3的表达能够有效抑制小鼠肺泡巨噬细胞的凋亡,而这种抑制作用可能是通过抑制凋亡蛋白酶 Caspase-3的表达,同时促进 Bcl-2蛋白的表达来实现的。