MiR-192靶向负调控Bim表达诱导肺癌顺铂耐药

• 作者: 吴蘅 周清华 尤嘉琮 张芳 李永文 李洋 李雪冰 李颖 沈旺 潘振华 王玉丽 王珉 祖玲玲 齐康
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 关键词: 肺肿瘤 miRNA芯片 RT-PCR miR-192 Bim
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 384-390
• 页数: 7页
• 字数: 5115字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3779/j.issn.1009-3419.2014.05.04

摘要

背景与目的顺铂是非小细胞肺癌化疗的一线药物，但获得性耐药限制了其疗效的发挥。本研究的目的是筛选鉴定与肺癌顺铂耐药相关的microRNAs，探讨其与肺癌顺铂耐药的影响及分子机制。方法应用miRNA芯片及RT-PCR筛选鉴定A549与A549/DDP肺癌细胞间的差异表达miRNAs，将差异表达miR-192转染A549和A549/DDP细胞株，CCK-8检测miR-192对半数抑制浓度（half inhibition concentration, IC50）的影响，流式细胞术检测细胞凋亡，生物软件预测及双荧光素酶报告基因法寻找miR-192的靶基因，RT-PCR及Western blot检测靶基因表达水平在转染前后的变化。结果 MiR-192在A549/DDP中显著高表达，表达量是A549细胞表达量的37.59±0.35倍。在低表达miR-192的A549细胞中过表达miR-192，细胞对顺铂的IC50显著增高，顺铂引起的细胞凋亡率显著降低；反之，在高表达miR-192的A549/DDP中抑制miR-192的表达，顺铂的IC50显著降低，顺铂引起的细胞凋亡率显著增加。miR-192可靶向作用促凋亡基因Bim的3’-UTR，并在转录后水平负向调控Bim的表达。结论 MiR-192通过靶向负调控促凋亡基因Bim表达，诱导肺腺癌细胞株A549产生顺铂耐药，并减少顺铂引起的细胞凋亡。