结球甘蓝叶片卷曲相关7个同源异型盒基因的克隆与表达分析

• 作者: 任雪松 宋明 张林成 王小佳 蒲全明 高启国
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 结球甘蓝 同源异型盒蛋白 基因克隆 表达分析
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 蔬菜
• 页码范围: 859-868
• 分类号: S635.1
• 语种: 中文

摘要

以结球甘蓝(Brassica oleraceaL.)‘519’品系为试材,通过结球期茎尖和叶片以及莲座期茎尖和叶片的转录组对比分析,筛选出4个显著差异表达HB类基因,分别为BoHAT2、BoHB12、BoHB7和BoHB27.进一步对上述4个基因以及调控拟南芥(Arabidopsis thaliana)叶片卷曲但在结球甘蓝转录组中未检测到表达差异的基因BoPHB、BoPHV和BoREV进行了同源克隆.序列分析表明上述7个基因都含有同源异型域(homeodomain,HD),具有同源异型盒(homeobox,HB)蛋白家族的典型结构特征.BlastP(蛋白序列与蛋白库做比对)表明它们与拟南芥的同源蛋白相似性高,来自结球甘蓝的BoHAT2、BoHB12、BoHB7、BoHB27、BoPHB、BoPHy、BoREy与拟南芥中的HAT2、ATHB12、ATHB 7、ATHB27、PHB、PHV、REV蛋白同源,同源性分别为86％、80％、79％、60％、94％、95％和96％.BlastP比对和进化树分析结果表明,BoHAT2属于HD-Zip Ⅱ类,BoHB12和BoHB7属于HD-Zip Ⅰ类,BoHB27属于ZF-HD,BoPHB、BoPHV和BoREV属于HD-ZipⅢ类.BoHAT2、BoHBI2、BoHB7、BoHB27、BoPHB、BoPHV、BoREV在结球甘蓝莲座期到结球期的茎尖和叶片中均有表达,BoHB12和BoHB7在结球期叶片中表达量显著增高,分别是莲座期叶片的38.1倍和6.2倍,其余基因表达量差异不明显,表明BoHB12和BoHB7可能是结球甘蓝球叶自然卷曲过程中的主效调控基因.