过表达全局调控因子LaeA对橘青霉美伐他汀的合成及产孢的影响

• 作者: 廖国建 曹双 胡昌华 郑跃亮 黄宇琪
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 全局性调控因子LaeA 过表达 美伐他汀 途径调控因子mlcR 橘青霉
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 生理和代谢
• 页码范围: 1438-1445
• 分类号: Q935
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.2014.12.006

摘要

[目的]研究橘青霉中全局性调控因子LaeA过表达对美伐他汀生物合成过程及产孢的影响.[方法]同源克隆法从橘青霉中克隆获得laeA基因,构建pGiHTGi-laeA载体,经农杆菌介导转化转入橘青霉,利用hygromycin基因进行阳性克隆子的PCR筛选.使用HPLC方法比较PGA发酵液中橘青霉野生型菌株WT和LaeA过表达菌株OE::laeA的美伐他汀产量差异.血球计数法进行孢子产量比较.荧光定量PCR方法分析WT和OE::laeA中美伐他汀合成基因簇表达量.[结果]成功构建pGiHTGi-laeA载体,并获得LaeA过表达橘青霉菌株(OE::laeA).OE::laeA中,laeA基因表达量较WT增加29％,mlcB表达量较WT增加72％,mlcR表达量增加153％,孢子产量由(2.38 ±0.24)×107/cm2减少到(1.40 ±0.11)×107/cm2,美伐他汀产量从(35.77±4.63) mg/L提高到(201.46 ±9.98) mg/L.[结论]在橘青霉中过表达LaeA可能通过提高mlcR和mlcB基因的转录来增加美伐他汀的产量,同时过表达laeA基因不利于孢子的形成.这些结果为美伐他汀生物合成的全局性调控和高产菌株的开发提供基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡昌华	西南大学药学院重庆药物过程与质量控制工程技术中心	58	255	9.0	13.0
2	廖国建	西南大学药学院重庆药物过程与质量控制工程技术中心	27	101	6.0	9.0
3	黄宇琪	西南大学药学院重庆药物过程与质量控制工程技术中心	10	66	6.0	8.0
4	曹双	西南大学药学院重庆药物过程与质量控制工程技术中心	2	12	1.0	2.0
5	郑跃亮	西南大学药学院重庆药物过程与质量控制工程技术中心	1	11	1.0	1.0