玉米自交系SSR标记技术的优化?

• 作者: 刘敬泽 刘炜 姜涛 才源 李凯 王丕武
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 玉米 自交系 PCR反应条件 退火温度 染色方法
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 653-659
• 页数: 7页
• 分类号: S513.032
• 字数: 4787字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2014.1991

摘要

选用7个玉米自交系为材料，分别研究了PCR反应体系中Mg2＋浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶量、引物浓度、模板DNA量，退火温度，PCR产物变性处理及银染方法对玉米自交系SSR标记结果的影响，优化了玉米自交系SSR标记技术。结果表明：优化后的20μL PCR反应体系为1?5 mmol／L Mg2＋、0?05 mmol／L dNTPs、0?5 U Taq DNA聚合酶、0?05μmol／L引物、10倍PCR buffer 2?0μL和80 ng模板DNA，最优退火温度为60℃。 PCR产物在95℃条件下变性5 min后上样电泳，电泳结束后胶板用蒸馏水快速漂洗，洗后用0?1％的硝酸银溶液银染8 min，再用蒸馏水洗30 s，最后用3％氢氧化钠与1％甲醛显影。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丕武	吉林农业大学农学院	249	1853	20.0	32.0
2	李凯	吉林农业大学农学院	24	501	10.0	22.0
3	刘敬泽		2	4	1.0	2.0
4	才源	吉林农业大学农学院	9	26	3.0	5.0
5	姜涛	吉林农业大学农学院	2	14	2.0	2.0