shRNA抑制CD147基因表达对HT29细胞增殖、侵袭和致瘤能力的影响

• 作者: 何帮顺 孙慧玲 李瑞 潘玉琴 王书奎 许晔琼 邓齐文 高天翼
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 CD147基因 HT29细胞
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 肿瘤标志物
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: R574.62|R574.63
• 字数: 4714字
• 语种: 中文

摘要

目的 用RNA干扰(RNAi)技术抑制CD147基因的表达,检测其对人结直肠癌细胞系HT29细胞增殖、侵袭和致瘤能力的影响.方法 设计合成CD147特异性的RNA干扰表达质粒pYr-mir30-shRNA,稳定转染HT29细胞,分别获得HT29/shR-NA-control和HT29/shRNA细胞;RT-PCR和western blot分别检测CD147、MCT1、MCT4 mRNA和蛋白质的表达;明胶酶谱法检测MMP-2和MMP-9的活性;CCK8法分析细胞的增殖能力;Transwell小室检测细胞的侵袭能力;观察结直肠癌裸鼠皮下移植瘤的致瘤能力.结果 与空白组比较,RNA干扰后的细胞中CD147、MCT1 mRNA(F分别为99.645和84.985)及蛋白质(F分别为73.675和19.842)的表达水平均降低(P均＜0.01);MMP-2和MMP-9的活性均降低(P均＜0.01);细胞增殖(t分别为7.491、15.023、14.584、6.637和11.211,P均＜0.01)和侵袭(F=330.443,P＜0.01)能力均降低,使裸鼠荷瘤能力下降(F=365.679,P＜0.01).结论 RNA干扰能有效抑制CD147基因的表达,抑制HT29细胞的增殖和侵袭能力.