脊尾白虾抗细胞凋亡因子DAD1基因的克隆及其组织表达分析

• 作者: 刘萍 李健 李吉涛 段亚飞 陈萍 高保全
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 脊尾白虾 抗细胞凋亡因子(DAD1) 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 44-52
• 页数: 9页
• 分类号: Q959|S917
• 字数: 6894字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2014.00044

摘要

取健康脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)成体,体长(5.81±0.32) cm,体质量(1.18±0.35) g。根据本实验室已构建的脊尾白虾血细胞全长cDNA文库进行EST测序分析,获得脊尾白虾抗细胞凋亡因子DAD1基因的cDNA全长并命名为EcDAD1基因。该序列全长645 bp,包括5′非编码区184 bp,开放阅读框345 bp和3′非编码区116 bp,共编码114个氨基酸,预测分子量为12.85 kD,理论等电点为8.75。同源性分析表明,脊尾白虾抗细胞凋亡因子EcDAD1氨基酸序列与其他物种DAD1有高度同源性,与斑节对虾(Penaeus monodon)的相似性最高,为92%；与其他无脊椎动物的相似性为73%~80%。系统进化分析表明,脊尾白虾EcDAD1与斑节对虾的DAD1紧密聚为一支。荧光定量 PCR 分析结果表明, EcDAD1基因在脊尾白虾血细胞、鳃、肝胰腺、肌肉、卵巢、肠、胃和眼柄中均有表达,其中卵巢中的相对表达量最高。感染鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和WSSV后6 h和12 h,脊尾白虾血细胞和肝胰腺中EcDAD1的表达量较对照组均显著增加(P<0.01),且不同时间点间差异显著,表明EcDAD1基因可能在脊尾白虾抵抗病原体入侵机体的过程中具有重要作用。