miR-34a与人乳腺癌细胞系MCF-7多柔比星耐药的关系

• 作者: 唐金海 李文静 李秀娟 蒋胜高 赵建华 钟山亮
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺癌 多柔比星 微小核糖核酸-34a Notch1 耐药
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 肿瘤标志物
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: R737.9
• 字数: 4730字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨miR-34a对人乳腺癌细胞系MCF-7多柔比星(Adr)耐药性的影响及其潜在分子机制.方法 用低浓度逐步加量诱导法,建立MCF-7的Adr耐药细胞系(MCF-7/Adr),用miRNA芯片结合RT-qPCR筛选并验证miRNA在MCF-7/Adr及MCF-7细胞中的表达差异;用生物信息学软件对miR-34a进行基因靶向预测;通过miR-34a模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor)转染实验结合MTT、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)观察miR-34a的表达变化对细胞耐药性的影响,western blot检测转染后Notch1蛋白表达水平.结果 成功构建MCF-7/Adr耐药亚系;与MCF-7细胞相比,MCF-7/Adr中有156个差异表达miRNA;其中miR-34a的表达水平明显降低(t=11.597,P=0.000).与阴性对照组相比,转染miR-34a mimic后MCF-7/Adr细胞miR-34a表达水平增高(t=8.013,P=0.001),且增加了对Adr的敏感性(t=18.160,P=0.000);转染miR-34a inhibitor后MCF-7细胞miR-34a的表达水平降低(t=9.979,P=0.000),且降低了对Adr的敏感性(t=4.130,P=0.009).靶基因预测结果显示,Notch1为miR-34a的特异性靶基因.western blot结果表明,与空白对照组和阴性对照组相比,MCF-7/Adr细胞转柒miR-34a mimic后,Notch1蛋白的表达水平下降(F =64.949,P=0.000).MCF-7细胞转染miR-34a inhibitor后,Notch1蛋白的表达水平升高(F=10.938,P =0.010).结论 MCF-7/Adr及MCF-7细胞miRNA表达谱存在差异;miR-34a参与调节细胞对Adr的耐药过程,Notch1基因可能是调控靶基因之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋胜高	江苏省肿瘤医院临床检验中心	5	16	3.0	4.0
2	唐金海	江苏省肿瘤医院普外科	113	601	14.0	18.0
3	李秀娟	江苏省肿瘤医院普外科	3	17	2.0	3.0
4	李文静	江苏省肿瘤医院临床检验中心	1	7	1.0	1.0
5	钟山亮	江苏省肿瘤医院临床检验中心	7	23	3.0	4.0
6	赵建华	江苏省肿瘤医院临床检验中心	25	84	6.0	7.0