玉米基因组Fosmid文库构建及类受体激酶基因(Psy1和Psy2)筛选

• 作者: 吴晓军 徐丽 王守才
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 玉米 Fosmid文库 转座子
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 1306-1313
• 页数: 8页
• 字数: 6180字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.10.014

摘要

玉米(Zea mays L.)病害的发生和流行是限制玉米高产稳产的重要因素.玉米细菌性褐斑病是目前具有潜在危害性的病害之一,在抗性基因遗传规律和染色体定位研究方面取得一定进展,但在基因克隆、功能鉴定等研究上进展较为缓慢,利用构建的Fosmid文库克隆抗病候选基因是目前较为快捷和有效的方法之一.本研究以玉米细菌性褐斑病的抗病自交系F349为材料构建了玉米Fosmid文库,克隆总数约为3.7×105个,平均插入片段长度为32 kb,实现4.73倍的玉米基因组覆盖,筛选到任意基因或序列的概率达到了99.12％.基于该文库,利用不同引物组合进行了两个类受体蛋白激酶基因(Psy1和Psy2)的克隆筛选,得到14个阳性克隆,其中4个阳性克隆包含Psy2基因和Psy1基因部分片段;3个阳性克隆包含完整Psy1基因;对其中两个阳性克隆13-12F-23和32-4A-6的测序结果显示,Psy1基因的启动子和内含子分别被插入了10.0和13.5 kb的外源片段;13.5 kb的插入片段是LTR家族的huck反转录转座子,10.0kb的插入片段是含有helitron转座元件的复杂转座子;扩增到了Psy1基因的cDNA全长,说明这两种类型反转录转座子的插入并未使基因失活.本研究为玉米基因的克隆和功能分析提供了一种可行的研究途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐丽	中国农业大学国家玉米改良中心	6	46	4.0	6.0
2	王守才	中国农业大学国家玉米改良中心	21	712	10.0	21.0
3	吴晓军	中国农业大学国家玉米改良中心	2	3	1.0	1.0