条石鲷促性腺激素β(FSH,LH)亚基cDNA克隆及表达特性分析

• 作者: 史宝 徐永江 李晓晓 柳学周 王珊珊 臧坤 陈圣毅
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 条石鲷 促性腺激素β亚基 cDNA克隆 表达 卵巢发育周期
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 页码范围: 1673-1686
• 分类号: S917.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49299

摘要

采用同源性克隆和cDNA末端快速扩增(RACE)方法克隆了条石鲷GtHβ cDNA序列,并分析了GtHβ mRNA在条石鲷组织中的表达差异和在卵巢发育不同时期的垂体、卵巢、脑中表达水平变化.结果发现,条石鲷FSH cDNA全长554 bp,ORF长363 bp,编码了120个氨基酸,前18个氨基酸为信号肽.条石鲷LH cDNA全长857 bp,ORF长450 bp,编码了149个氨基酸,前24个氨基酸为信号肽.FSH和LH包含了12个保守的半胱氨酸残基(Cys)和一个N-糖基化位点,在LH的第4和第5个Cys之间存在着硬骨鱼类特异性的Cys-Ser-Gly-His(CSGH)区域.同源性比较和进化分析显示,条石鲷FSH和LH与鲈形目鱼类的进化关系较近.采用实时荧光定量PCR法检测发现,FSH mRNA和LH mRNA在垂体中的表达量最高,其次是性腺;FSH mRNA在头肾和肾脏中不表达,LH mRNA在头肾中不表达.周期表达分析显示,垂体中的FSH mRNA在卵巢发育的Ⅳ期达到最大值,LH mRNA在Ⅴ期达到最大值;卵巢中的FSH mRNA在Ⅴ期达到最低值,而LH mRNA在Ⅴ期达到最大值;脑中的FSH和LHmRNA在Ⅴ期达到最低值.激素分析显示,血清中FSH在卵巢发育的Ⅳ期达到最大值,而LH在Ⅴ期达到最大值,血清中FSH和LH水平与垂体中FSH mRNA和LH mRNA表达趋势一致.