人转录因子sp1在大肠杆菌中的表达与体外纯化

• 作者: 强倩 李淑锋 王琪炜 陈宝俊
• 来源期刊: 东南大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: sp1蛋白 转录因子 大肠杆菌 蛋白表达与纯化
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: Q876
• 字数: 2447字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2014.01.001

摘要

目的:在大肠杆菌中表达人源转录因子sp1蛋白,并进行体外纯化.方法:首先将人源sp1真核表达质粒pCMV-sp1中的sp1 cDNA用限制性内切酶切开,连入原核表达质粒pET28b,构建原核表达重组质粒pET28b-sp1-699c;然后将重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达带His-Tag的融合蛋白His-sp1 (88-786aa),通过包涵体的变复性和Ni-IDA亲和层析纯化后,SDS-PAGE鉴定纯化后的蛋白.结果:融合蛋白His-sp1在大肠杆菌内得到高效表达,纯化后可得到较高纯度的蛋白.结论:本研究获得了较高纯度的融合蛋白His-sp1,为进一步研究sp1蛋白对靶基因的转录调控奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈宝俊	南京大学医学院附属鼓楼医院心胸外科	11	25	3.0	4.0
2	李淑锋	东南大学医学院生物化学与分子生物学系	11	62	5.0	7.0
3	王琪炜	东南大学生命科学研究院	3	4	1.0	2.0
4	强倩	东南大学生命科学研究院	1	4	1.0	1.0