ALK-3、Pax-8基因抑制后大鼠心肌细胞中Smad1/5/8的表达

• 作者: 吴漪皓 杨德业 林素 陆圣月 陈德准 黄晓燕
• 来源期刊: 温州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: ALK-3 Pax-8 Smad1/5/8 p-Smad1/5/8 磷酸化 先天性心脏病 大鼠
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 313-317
• 页数: 5页
• 分类号: R541
• 字数: 4613字
• 语种: 中文

摘要

目的：抑制大鼠胚胎心肌细胞株中ALK-3、Pax-8基因的表达后，探索Smad1/5/8在其中所起的作用。方法：将H9C2（2-1）大鼠胚胎心肌细胞分为4组：针对Pax-8基因的小干扰RNA（Pax-8siRNA）组、ALK-3基因的小干扰RNA（ALK-3siRNA）组、阴性对照（NCsiRNA）组和空白对照组。前3组分别给予相应siRNA（5.0μL）和Lipofectamine2000（5.0μL）配制成的siRNA-脂质体复合物溶液，空白对照组给予等量的细胞培养基。采用qRT-PCR测定Pax-8和ALK-3的mRNA表达，Westernblot法检测磷酸化Smad1/5/8（p-Smad1/5/8）和半胱天冬酶（Caspase）-3表达。结果：与NCsiRNA组和空白对照组比较，Pax-8siRNA组的Pax-8mRNA表达分别下调50%（P＜0.05）和54%（P＜0.05），ALK-3siRNA组的ALK-3mRNA表达分别下调49%（P＜0.05）和53%（P＜0.05），而NCsiRNA组与空白对照组间差异无统计意义（P＞0.05）。与NCsiRNA组和空白对照组比较，ALK-3siRNA组p-Smad1/5/8的蛋白表达量分别下调58%（P＜0.05）和55%（P＜0.05），Pax-8siRNA组p-Smad1/5/8的蛋白表达量差异无统计意义（P＞0.05）。NCsiRNA组与空白对照组间差异无统计意义（P＞0.05）。与NCsiRNA组和空白对照组比较，Pax-8siRNA组Caspase-3蛋白表达量分别上调76%（P＜0.05）和81%（P＜0.05），ALK-3siRNA组Caspase-3的蛋白表达量分别上调135%（P＜0.05）和140%（P＜0.05），而NCsiRNA组与空白对照组间差异无统计意义（P＞0.05）。结论：在大鼠胚胎心肌细胞株中对基因ALK-3、Pax-8干扰后能引起细胞凋亡蛋白Caspase-3明显增多，并且在ALK-3siRNA组发现Smad1/5/8蛋白磷酸化减少，而Pax-8siRNA组中未发现Smad1/5/8磷酸化减少，提示Smad1/5/8在基因ALK-3被干扰后引起细胞凋亡蛋白Caspase-3增多中起重要作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨德业	温州医科大学附属第一医院心内科	10	26	2.0	4.0
3	林素	温州医科大学附属第一医院心内科	5	19	2.0	4.0
6	吴漪皓	温州医科大学附属第一医院心内科	3	4	1.0	2.0
7	陈德准	温州医科大学附属第一医院心内科	2	0	0.0	0.0
8	黄晓燕	温州医科大学附属第一医院心内科	3	1	1.0	1.0
9	陆圣月	温州医科大学附属第一医院心内科	1	0	0.0	0.0