5′-氮杂-2'-脱氧胞苷对结直肠癌细胞株HT-29和LoVo中MGMT基因甲基化状态、mRNA表达及蛋白表达的影响

• 作者: 张玉萍 方园 王鲁平 葛畅 许春伟
• 来源期刊: 解放军医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结直肠肿瘤 DNA甲基化 5′-氮杂-2'-脱氧胞苷 MGMT基因
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 肿瘤基础与临床
• 页码范围: 33-38
• 页数: 6页
• 分类号: R735.34
• 字数: 5455字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-140X.2014.06.009

摘要

目的：探讨甲基化酶抑制剂5′-氮杂-2'-脱氧胞苷(5′-Aza-CdR)对结直肠癌(colorectal cancer, CRC)细胞株HT-29和LoVo中MGMT基因甲基化水平、mRNA及蛋白表达的影响。方法用0.5、1.0、1.5μmol/L浓度的5′-Aza-CdR处理CRC细胞株HT-29和LoVo。应用MethyLight方法、实时荧光定量PCR方法及蛋白印迹试验( Western-blot)检测药物处理前后HT-29和LoVo细胞中MGMT基因的甲基化状态、mRNA和蛋白表达情况。结果 MethyLight检测HT-29和LoVo细胞中MGMT蛋白在药物作用后异常甲基化得到逆转。实时荧光定量PCR检测5′-Aza-CdR浓度为0.5、1.0、1.5μmol/L组HT-29细胞株和LoVo细胞株MGMT基因mRNA表达水平均较对照组上调,Western blot检测5′-Aza-CdR浓度为0.5、1.0、1.5μmol/L组MGMT蛋白表达水平均较对照组上调,且均具有药物剂量依赖性(P<0．05,P<0．01)。结论 CRC细胞株HT-29和LoVo中MGMT基因启动子甲基化可能是导致该基因表达下调甚至失活的主要原因。5′-Aza-CdR能够逆转CRC细胞株HT-29和LoVo中MGMT基因的甲基化状态,并能恢复mRNA及蛋白重新表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王鲁平	北京军区总医院病理科	78	412	9.0	15.0
2	方园	北京军区总医院病理科	5	19	3.0	4.0
3	张玉萍	北京军区总医院病理科	6	16	3.0	3.0
4	许春伟	北京军区总医院病理科	20	71	5.0	6.0
5	葛畅	北京军区总医院病理科	14	51	4.0	6.0