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体外模拟乳腺脂肪微环境中过表达BMP9对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其机制探讨
体外模拟乳腺脂肪微环境中过表达BMP9对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其机制探讨
作者:
姜亚运
张彦
张志慧
王婷
王晋蜀
王维
陈莹莹
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
乳腺肿瘤
骨形态发生蛋白质类
脂细胞
细胞增殖
细胞迁移分析
摘要:
目的:采用体外共培养技术模拟乳腺脂肪微环境,研究人骨形态发生蛋白9 (bone morphogenetic protein 9,BMP9)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和迁移的影响,并初步探讨其可能的机制.方法:将重组腺病毒Ad-BMP9(以Ad-GFP作为对照)导入MDA-MB-231细胞中,构建MDA-MB-231/Ad-BMP9重组细胞,再与前体脂肪细胞3T3-L1在Transwell共培养体系中间接共培养3d.荧光显微镜下观察共培养体系中重组腺病毒Ad-BMP9在MDA-MB-231细胞中的感染效率,并通过RT-PCR和蛋白质印迹法验证BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中成功过表达.然后,分别采用MTT法、FCM法、划痕愈合实验和Transwell迁移实验检测MDA-MB-231细胞增殖和迁移能力的变化;蛋白质印迹法检测共培养的2种细胞中增殖和转移相关因子瘦素(leptin)的表达水平变化;细胞免疫荧光法和蛋白质印迹法分别检测MDA-MB-231细胞中leptin受体OB-R及leptin信号通路关键分子的表达水平变化.结果:荧光显微镜下观察到重组腺病毒Ad-BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中感染效率为70%左右,且BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中成功过表达(P<0.05).在模拟乳腺脂肪微环境的共培养体系中过表达BMP9后,乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和迁移受到明显抑制(P<0.05),并且细胞周期阻滞于G2/M期(P<0.001).过表达BMP9后,前体脂肪细胞3T3-L1中leptin表达显著下调(P<0.05),而MDA-MB-231细胞中磷酸化的STAT3 (phosphorylated STAT3,p-STAT3)和磷酸化的ERK1/2 (phosphorylated ERK1/2,p-ERK1/2)水平均明显下调(均P<0.05).结论:模拟乳腺脂肪微环境的共培养体系中,BMP9过表达可以调节乳腺癌细胞与前体脂肪细胞的相互作用,抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和迁移,且该抑制作用可能与leptin经典信号通路有关.
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篇名
体外模拟乳腺脂肪微环境中过表达BMP9对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其机制探讨
来源期刊
肿瘤
学科
医学
关键词
乳腺肿瘤
骨形态发生蛋白质类
脂细胞
细胞增殖
细胞迁移分析
年,卷(期)
2014,(9)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
781-789
页数
9页
分类号
R737.9
字数
语种
中文
DOI
10.3781/j.issn.1000-7431.2014.09.002
五维指标
作者信息
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姓名
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张彦
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王婷
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王维
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骨形态发生蛋白质类
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细胞增殖
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研究来源
研究分支
研究去脉
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相关学者/机构
期刊影响力
肿瘤
主办单位:
上海市肿瘤研究所
上海交通大学医学院附属仁济医院
出版周期:
月刊
ISSN:
1000-7431
CN:
31-1372/R
开本:
大16开
出版地:
上海市斜土路2200弄25号
邮发代号:
4-289
创刊时间:
1981
语种:
chi
出版文献量(篇)
4424
总下载数(次)
6
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