体外模拟乳腺脂肪微环境中过表达BMP9对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其机制探讨

• 作者: 姜亚运 张彦 张志慧 王婷 王晋蜀 王维 陈莹莹
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺肿瘤 骨形态发生蛋白质类 脂细胞 细胞增殖 细胞迁移分析
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 781-789
• 页数: 9页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2014.09.002

摘要

目的:采用体外共培养技术模拟乳腺脂肪微环境,研究人骨形态发生蛋白9 (bone morphogenetic protein 9,BMP9)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和迁移的影响,并初步探讨其可能的机制.方法:将重组腺病毒Ad-BMP9(以Ad-GFP作为对照)导入MDA-MB-231细胞中,构建MDA-MB-231/Ad-BMP9重组细胞,再与前体脂肪细胞3T3-L1在Transwell共培养体系中间接共培养3d.荧光显微镜下观察共培养体系中重组腺病毒Ad-BMP9在MDA-MB-231细胞中的感染效率,并通过RT-PCR和蛋白质印迹法验证BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中成功过表达.然后,分别采用MTT法、FCM法、划痕愈合实验和Transwell迁移实验检测MDA-MB-231细胞增殖和迁移能力的变化;蛋白质印迹法检测共培养的2种细胞中增殖和转移相关因子瘦素(leptin)的表达水平变化;细胞免疫荧光法和蛋白质印迹法分别检测MDA-MB-231细胞中leptin受体OB-R及leptin信号通路关键分子的表达水平变化.结果:荧光显微镜下观察到重组腺病毒Ad-BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中感染效率为70％左右,且BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中成功过表达(P＜0.05).在模拟乳腺脂肪微环境的共培养体系中过表达BMP9后,乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和迁移受到明显抑制(P＜0.05),并且细胞周期阻滞于G2/M期(P＜0.001).过表达BMP9后,前体脂肪细胞3T3-L1中leptin表达显著下调(P＜0.05),而MDA-MB-231细胞中磷酸化的STAT3 (phosphorylated STAT3,p-STAT3)和磷酸化的ERK1/2 (phosphorylated ERK1/2,p-ERK1/2)水平均明显下调(均P＜0.05).结论:模拟乳腺脂肪微环境的共培养体系中,BMP9过表达可以调节乳腺癌细胞与前体脂肪细胞的相互作用,抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和迁移,且该抑制作用可能与leptin经典信号通路有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张彦		74	756	14.0	26.0
2	王婷		25	63	5.0	7.0
3	王维		17	61	5.0	7.0
4	张志慧		4	0	0.0	0.0
5	陈莹莹		4	3	1.0	1.0
6	王晋蜀		5	1	1.0	1.0
7	姜亚运		4	0	0.0	0.0