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摘要:
目的:采用体外共培养技术模拟乳腺脂肪微环境,研究人骨形态发生蛋白9 (bone morphogenetic protein 9,BMP9)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和迁移的影响,并初步探讨其可能的机制.方法:将重组腺病毒Ad-BMP9(以Ad-GFP作为对照)导入MDA-MB-231细胞中,构建MDA-MB-231/Ad-BMP9重组细胞,再与前体脂肪细胞3T3-L1在Transwell共培养体系中间接共培养3d.荧光显微镜下观察共培养体系中重组腺病毒Ad-BMP9在MDA-MB-231细胞中的感染效率,并通过RT-PCR和蛋白质印迹法验证BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中成功过表达.然后,分别采用MTT法、FCM法、划痕愈合实验和Transwell迁移实验检测MDA-MB-231细胞增殖和迁移能力的变化;蛋白质印迹法检测共培养的2种细胞中增殖和转移相关因子瘦素(leptin)的表达水平变化;细胞免疫荧光法和蛋白质印迹法分别检测MDA-MB-231细胞中leptin受体OB-R及leptin信号通路关键分子的表达水平变化.结果:荧光显微镜下观察到重组腺病毒Ad-BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中感染效率为70%左右,且BMP9在共培养体系的MDA-MB-231细胞中成功过表达(P<0.05).在模拟乳腺脂肪微环境的共培养体系中过表达BMP9后,乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和迁移受到明显抑制(P<0.05),并且细胞周期阻滞于G2/M期(P<0.001).过表达BMP9后,前体脂肪细胞3T3-L1中leptin表达显著下调(P<0.05),而MDA-MB-231细胞中磷酸化的STAT3 (phosphorylated STAT3,p-STAT3)和磷酸化的ERK1/2 (phosphorylated ERK1/2,p-ERK1/2)水平均明显下调(均P<0.05).结论:模拟乳腺脂肪微环境的共培养体系中,BMP9过表达可以调节乳腺癌细胞与前体脂肪细胞的相互作用,抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和迁移,且该抑制作用可能与leptin经典信号通路有关.
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文献信息
篇名 体外模拟乳腺脂肪微环境中过表达BMP9对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其机制探讨
来源期刊 肿瘤 学科 医学
关键词 乳腺肿瘤 骨形态发生蛋白质类 脂细胞 细胞增殖 细胞迁移分析
年,卷(期) 2014,(9) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 781-789
页数 9页 分类号 R737.9
字数 语种 中文
DOI 10.3781/j.issn.1000-7431.2014.09.002
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张彦 74 756 14.0 26.0
2 王婷 25 63 5.0 7.0
3 王维 17 61 5.0 7.0
4 张志慧 4 0 0.0 0.0
5 陈莹莹 4 3 1.0 1.0
6 王晋蜀 5 1 1.0 1.0
7 姜亚运 4 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
乳腺肿瘤
骨形态发生蛋白质类
脂细胞
细胞增殖
细胞迁移分析
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
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相关学者/机构
期刊影响力
肿瘤
月刊
1000-7431
31-1372/R
大16开
上海市斜土路2200弄25号
4-289
1981
chi
出版文献量(篇)
4424
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6
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