癌胚抗原磷脂酰肌醇蛋白聚糖3单克隆抗体的制备及应用

• 作者: 刘涛 王玉亮 穆红
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 磷脂酰肌醇蛋白聚糖类 抗体,单克隆 重组融合蛋白质类 杂交瘤 细胞系 癌,肝细胞 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 235-237
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2014.03.013

摘要

目的：制备抗癌胚抗原磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）单克隆抗体，并初步应用。方法利用PCR方法，将GPC3基因重组到原核表达载体pET16b中，在大肠杆菌中表达，纯化后的GPC3融合蛋白对Balb/c小鼠脾内包埋免疫，取小鼠脾细胞与Sp2/0细胞进行细胞融合，应用间接酶联免疫吸附测定（ELISA）和Western blot法筛选及鉴定分泌特异性抗GPC3单克隆抗体的杂交瘤细胞株，间接免疫荧光检测肝癌细胞中GPC3表达。结果成功构建了GPC3原核表达载体，在大肠杆菌中的诱导表达重组GPC3蛋白。应用单克隆抗体杂交瘤技术成功制备1株稳定分泌抗GPC3单克隆抗体的杂交瘤细胞株，通过Western blot鉴定具有高度的特异性，间接免疫荧光实验显示单克隆抗体能与HepG2细胞内GPC3特异性结合。结论成功制备出特异性抗人GPC3单克隆抗体。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	穆红	天津市第一中心医院卫生部危重病急救医学重点实验室	88	436	13.0	16.0
2	王玉亮	天津市第一中心医院卫生部危重病急救医学重点实验室	46	145	7.0	9.0
3	刘涛	天津市第一中心医院卫生部危重病急救医学重点实验室	10	19	3.0	4.0