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PPFP基因转染人正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1前后的蛋白质组学研究
PPFP基因转染人正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1前后的蛋白质组学研究
作者:
刘剑鸣
李新营
李萃
段朝军
王志明
邓姣
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
甲状腺肿瘤
基因转移技术
蛋白质组学
PPFP基因
摘要:
目的:采用蛋白质组学技术检测转染致瘤基因PPFP前后人正常甲状腺Nthy-ori 3-1细胞中蛋白质组分的改变,筛选PPFP基因调控的蛋白,以期为寻找甲状腺滤泡状癌(follicular thyroid carcinoma,FTC)的标志性蛋白或新的药物靶标蛋白提供线索.方法:收集Nthy-ori 3-1、Nthy-ori 3-1vector和Nthy-ori 3-1PPFP细胞,提取细胞总蛋白,采用二维凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)制备3组细胞的总蛋白2-DE图谱;应用PDQuest软件对2-DE图谱进行比较分析,寻找差异表达的蛋白质点;采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption-ionization time-of-flight tandem mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析技术对这些差异表达的蛋白质进行鉴定,并选取其中MALDI-TOF-MS鉴定分数较高、覆盖率较大且认为与FTC发生和发展关系较为密切的5种蛋白[prohibitin、半乳糖凝集素1(galectin-1)、细胞角蛋白8(cytokeratin 8)、cytokeratin 19和热休克蛋白27 (heat shock protein 27,HSP27)]作为验证对象,采用蛋白质印迹法检测各蛋白在3组细胞中的表达水平.结果:采用2-DE技术建立了Nthy-ori 3-1、Nthy-ori 3-1vector和Nthy-ori 3-1PPFP3组细胞的2-DE图谱.应用PDQuest软件分析发现,Nthy-ori 3-1PPFP细胞与亲本Nthy-ori 3-1细胞及空载体Nthy-ori3-1vector细胞中差异在2倍以上的蛋白质斑点有38个,采用MALDI-TOF-MS质谱分析技术结合数据库搜索,共鉴定出了28个差异蛋白质点.Nthy-ori 3-1PPFP细胞与2个对照组相比,表达上调的点有19个,表达下调的点有9个.蛋白质印迹法检测结果与蛋白质组学研究结果完全一致.结论:PPFP基因转染Nthy-ori 3-1细胞后共筛选获得28个差异表达的蛋白,这些差异表达的蛋白可能是PPFP基因调控的蛋白,为进一步阐明FTC发生和发展的分子机制奠定了基础.
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文献信息
篇名
PPFP基因转染人正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1前后的蛋白质组学研究
来源期刊
肿瘤
学科
医学
关键词
甲状腺肿瘤
基因转移技术
蛋白质组学
PPFP基因
年,卷(期)
2014,(9)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
795-802
页数
8页
分类号
R735.3+5
字数
语种
中文
DOI
10.3781/j.issn.1000-7431.2014.09.004
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节点文献
甲状腺肿瘤
基因转移技术
蛋白质组学
PPFP基因
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
肿瘤
主办单位:
上海市肿瘤研究所
上海交通大学医学院附属仁济医院
出版周期:
月刊
ISSN:
1000-7431
CN:
31-1372/R
开本:
大16开
出版地:
上海市斜土路2200弄25号
邮发代号:
4-289
创刊时间:
1981
语种:
chi
出版文献量(篇)
4424
总下载数(次)
6
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