当归苯丙氨酸解氨酶基因片段克隆和组织特异性表达分析

• 作者: 夏琦 张金林 李静 温随超 王引权 雒军
• 来源期刊: 草业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 当归 苯丙氨酸解氨酶基因 基因克隆 荧光定量PCR 基因表达
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 130-137
• 页数: 8页
• 分类号: S567.23+9|Q943.2
• 字数: 5682字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11686/cyxb20140416

摘要

苯丙氨酸解氨酶（PAL）在高等植物苯丙烷类代谢中具有重要作用，与植物体内很多重要的次生代谢产物的合成密切相关。当归主要药效成分阿魏酸是苯丙烷类代谢途径中的产物之一。为了探究阿魏酸生物合成和积累的机理，本研究克隆了当归苯丙氨酸解氨酶基因（PAL）部分序列，运用荧光定量PCR方法分析该基因在当归不同组织部位的表达差异。根据已经克隆的植物PAL保守序列设计一对扩增引物，以当归叶片总 RNA 为模板，采用反转录PCR（RT-PCR）方法扩增出PAL片段并连接到pGEM-T Easy载体上，转化大肠杆菌DH5α，阳性克隆经PCR检测后测序，得到一段706 bp 的序列（登录号：KJ000258），内含终止密码子 TAA，编码232个氨基酸，与GenBank中注册的伞形科植物珊瑚菜等6个物种的PAL核苷酸序列同源性和氨基酸序列同源性都在80％以上；运用SYBR Green荧光定量PCR方法，以当归肌动蛋白基因Actin为内参基因，检测PAL在当归不同组织中的表达量，结果显示PAL在叶片中表达量最高，其次是茎和根，叶片和茎中表达量分别是根中表达量的7．5和2．7倍。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张金林	兰州大学草地农业科技学院	48	689	13.0	25.0
2	李静	兰州大学草地农业科技学院	134	974	16.0	26.0
3	王引权	甘肃中医学院药学院	51	322	10.0	16.0
5	雒军	甘肃中医学院药学院	20	40	4.0	5.0
7	温随超	甘肃中医学院药学院	6	44	5.0	6.0