鸡Toll样受体2的克隆表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 吴双 左伟勇 朱善元 洪伟鸣 王安平 王永娟
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡Toll样受体2 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医?水产养殖
• 页码范围: 586-589
• 页数: 4页
• 分类号: S831.2
• 字数: 2715字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2014.03.021

摘要

试验旨在制备鼠抗鸡Toll样受体2(chTLR2)的多克隆抗体。采用RT-PCR方法从活化的鸡外周血淋巴细胞中扩增其胞外区片段chTLR2(chTLR2t1和chTLR2t2),并构建这两个片段的原核表达重组质粒,优化蛋白质的表达条件,SDS-PAGE和Western-blot法检测融合蛋白,将融合蛋白作为免疫原免疫Balb/c小鼠,利用相应的原核表达的全长蛋白检测特异性抗体滴度。结果显示,成功获得chTLR2的胞外区片段,构建的原核表达重组质粒经IPTG诱导能成功表达预期的重组蛋白,免疫小鼠可产生特异性抗体,抗体效价分别为1：16000和1：10000。表明制备的鼠抗chTLR2多抗具有良好的特异性,为进一步研究chTLR2的功能提供了重要材料。