MicroRNA-338-3p真核表达载体的构建及其对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响

• 作者: 宋土生 汪鲁敏 王文静 胡丽丽 赵凌宇 赵正豪 郭波 黄辰
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: miR-338-3p 胃癌 表达载体 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 442-446
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201404005

摘要

目的 构建microR-338-3p(miR-338-3p)过表达载体并探究其对人胃癌SGC-7901细胞系体外增殖的影响.方法 以pcDNATM 6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体为基础,经EcoR Ⅰ和HindⅢ双酶切和纯化后与人工合成miR-338-3p的寡聚核苷酸进行连接,转化至E.Coli Top10后,经过DNA测序、BLAST检测及验证;将构建成功的载体瞬时转染入SGC-7901细胞系中,应用Real-time PCR检测miR-338-3p的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖的改变.结果 测序验证成功构建了miR-338-3p的真核表达载体;瞬时转染SGC-7901细胞后miR-338-3p表达水平有显著增加,能够抑制SGC-7901细胞的体外增殖.结论 成功构建了miR-338-3p的真核表达载体,获得了瞬时表达miR-338-3p的人胃癌SGC-7901细胞系,初步证实miR-338-3p过表达可抑制肿瘤细胞的增殖.