猪肺炎支原体P65基因原核表达及免疫原性分析

• 作者: 刘茂军 姜平 张悦 杜改梅 王海燕 白昀 邵国青
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪肺炎支原体 P65基因 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 262-267
• 页数: 6页
• 分类号: S852.62
• 字数: 4835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.02.014

摘要

P65蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,与其他支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白.本研究通过基因合成获得P65基因中含有3个稀有密码子的前922 bp,利用PCR从Mhp168株扩增获得P65基因后段,然后通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)将前后段连接后,克隆入pET-32a(+)中,获得重组质粒pET-32a(+)/mhp P65,经IPTG诱导获得87 ku的重组融合蛋白,Western blot分析表明其与Mhp血清呈强阳性反应.将该重组蛋白免疫小鼠获得了高滴度的特异性抗体,表明该蛋白具有良好的免疫原性.本研究成功表达了可溶性的Mhp P65融合蛋白,其具有较好的免疫原性,这为猪肺炎支原体P65蛋白的功能研究以及诊断学方法的建立和亚单位疫苗的研制提供了帮助.