二氧化硅刺激 A549细胞水通道蛋白4表达研究

• 作者: 刘和亮 喻昌利 张芳 郝小惠
• 来源期刊: 中国职业医学
• 学科: 医学
• 关键词: 水通道蛋白4 二氧化硅 A549细胞 矽肺 聚合酶链式反应 免疫印迹法 免疫细胞化学法
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 642-647
• 页数: 6页
• 分类号: R135.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.11763/j.issn.2095-2619.2014.06.007

摘要

目的：探讨二氧化硅（ SiO2）刺激的人肺泡上皮细胞系A549细胞水通道蛋白4（ AQP－4）的表达及意义。方法将A549细胞分为0．5、1．0、2．0、4．0、8．0 h染尘组和抑制剂组，各染尘组分别以质量浓度为50 mg／L的SiO2混悬液刺激相应时间，抑制剂组先以浓度为100μmol／L的AQP－4抑制剂TGN－020孵育2．0 h，再以质量浓度为50 mg／L的SiO2混悬液刺激1．0 h，另设不予任何处理的对照组；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（ RT－PCR）法检测AQP－4 mRNA表达。同时，将A549细胞分为3．0、6．0、12．0、24．0 h染尘组和抑制剂组，各染尘组分别以质量浓度为50 mg／L的SiO2混悬液刺激相应时间，抑制剂组先以浓度为100μmol／L的TGN－020孵育2．0 h，再以质量浓度为50 mg／L的SiO2混悬液刺激6．0 h，另设不予任何处理的对照组；分别采用免疫印迹法和免疫细胞化学法检测AQP－4蛋白表达。结果 RT－PCR分析结果显示：与对照组比较，SiO2刺激后A549细胞AQP－4 mRNA相对表达水平呈现先升高后逐渐下降趋势，于刺激1．0 h后达到高峰值（P＜0．05），于刺激8．0 h后趋于正常水平（P＞0．05）。免疫印迹法和免疫细胞化学法分析结果均显示：与对照组比较，SiO2刺激后A549细胞AQP－4蛋白呈现先升高后逐渐下降趋势，于刺激6．0 h后达到高峰值（P＜0．05），但于刺激24．0 h后仍未下降至正常水平（P＜0．01）。抑制剂组AQP－4的mRNA相对表达水平和蛋白表达水平均低于SiO2刺激相同时间的染尘组（P＜0．01）。结论 SiO2刺激使A549细胞AQP－4的表达增高，其特异性抑制剂可抑制SiO2刺激引起的AQP－4表达增高，推测AQP－4可能参与了矽肺的发生发展过程。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝小惠	河北联合大学医学实验研究中心	22	84	6.0	8.0
2	刘和亮	河北联合大学医学实验研究中心	16	80	7.0	8.0
3	喻昌利	河北联合大学附属医院呼吸内科	37	231	10.0	12.0
7	张芳	河北联合大学临床医学院	2	10	1.0	2.0