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摘要:
目的 探讨宫颈癌Siha细胞自噬过程中微管末端结合蛋白1(EB1)基因的表达变化.方法 Hank平衡盐溶液(HBRSS)和秋水仙素处理体外培养的宫颈癌Siha细胞,分别采用实时定量PCR和Western blotting检测EB1基因、LC3和p62的表达,荧光显微镜检测特异性绿色荧光蛋白(GFP)-LC3以证实自噬体形成.结果 宫颈癌Siha细胞随HBSS作用时间延长,LC3 mRNA、EB1 mRNA、LC3-Ⅱ蛋白和EB1蛋白的表达均呈时间依赖性增加,差异具有统计学意义(P<0.05).EB1 mRNA和LC3 mRNA表达呈正相关,具有统计学意义(P<0.05).p62mRNA和蛋白在HBSS作用后的表达呈时间依赖性降低,差异具有统计学意义(P<0.05),EB1 mRNA和p62mRNA表达呈负相关,具有统计学意义(P<0.05).GFP-LC3结果显示,在HBSS作用12 h后,Siha细胞胞质中GFP-LC3强度和数目明显增加,含有GFP信号的细胞数量也明显增加.秋水仙素处理后,LC3、p62和EB1 mRNA及蛋白均未发生显著改变,差异无统计学意义(P>0.05),但此时几乎检测不到含GFP-LC3荧光信号的细胞.结论 EB1在饥饿状态Siha细胞中高表达,此时伴随LC3表达增加、p62表达降低以及自噬体形成增加,而用秋水仙素破坏EB1赖以作用的微管时,上述现象消失,充分表明EB1参与细胞自噬的可能.
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文献信息
篇名 微管末端结合蛋白1在Siha细胞自噬的表达和意义
来源期刊 解剖学报 学科 医学
关键词 宫颈癌 微管末端结合蛋白1 自噬 自噬体 实时定量聚合酶链反应 免疫印迹法
年,卷(期) 2014,(2) 所属期刊栏目 肿瘤生物学
研究方向 页码范围 228-233
页数 6页 分类号 R737.33
字数 4532字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.0529-1356.2014.02.015
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 罗雄燕 川北医学院附属医院风湿免疫研究所 21 105 6.0 9.0
2 蒋红 川北医学院附属医院风湿免疫研究所 43 144 7.0 9.0
3 刘青松 川北医学院检验系 21 50 4.0 6.0
7 夏艳辉 川北医学院附属医院风湿免疫研究所 7 34 4.0 5.0
8 刘益群 重庆医科大学附属第二医院呼吸内科 7 126 4.0 7.0
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研究主题发展历程
节点文献
宫颈癌
微管末端结合蛋白1
自噬
自噬体
实时定量聚合酶链反应
免疫印迹法
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