共表达内质网响应蛋白HAC1对α-半乳糖苷酶在毕氏酵母中表达的影响

• 作者: 李阳源 钟开新 陈丽芝
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: HAC1 α-半乳糖苷酶 毕氏酵母 共表达 UPR反应
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 页码范围: 184-189
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

为提高毕氏酵母（Pichia pastoris）中重组α-半乳糖苷酶的表达，将来源于P. pastoris GS115的hac1基因构建至pPIC9K表达载体中，转化到重组P. pastoris中与α-半乳糖苷酶共表达。研究结果表明，在AOX1启动子控制下，HAC1过表达提高了重组P. pastoris中α-半乳糖苷酶蛋白表达含量，使α-半乳糖苷酶活性提高了2.2倍。经PCR产物鉴定，结果表明重组P. pastoris基因组中插入hac1基因。经50 L发酵罐甲醇诱导168 h，Gal-HAC1-4#工程菌最终酶活达到6560 U/mL，比Gal-21#工程菌提高了27%。甲醇诱导后Gal-HAC1-4#发酵液中粗蛋白浓度均高于Gal-21#工程菌。表明共表达HAC1蛋白可提高毕氏酵母产α-半乳糖苷酶蛋白的能力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈丽芝		13	67	4.0	8.0
2	李阳源		9	16	3.0	3.0
3	钟开新		4	9	2.0	2.0