苏云金芽胞杆菌N-酰基高丝氨酸内酯酶基因（aiiA）在毕赤酵母中的优化表达

• 作者: 何晶晶 杨梅 毛惠民 简思美
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: N-酰基高丝氨酸内酯酶蛋白(AiiA) 分泌表达 密码子优化
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1347-1356
• 页数: 10页
• 字数: 6850字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.11.004

摘要

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)N-酰基高丝氨酸内酯酶基因(auto inducer inactivation A, aiiA)编码的N-酰基高丝氨酸内酯酶(N-acylhomoserine lactonase, AiiA)能够水解植物病原菌群体效应的信号分子N-酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactone, AHL)，进而使革兰氏阴性细菌群体感应受到抑制，减弱病原菌的致病性。本研究将aiiA基因连接至分泌型穿梭表达载体pPICZαB，获得重组表达质粒pPICZαB-aiiA，线性化后电击转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，获得重组工程菌GS115-pPICZαB-aiiA。利用定点突变技术，对aiiA基因进行密码子优化，获得重组工程菌GS115-pPICZαB-MaiiA。以终浓度为1%的甲醇、28℃条件下诱导表达，重组工程菌GS115-pPICZαB-aiiA和GS115-pPICZαB-MaiiA均成功表达并分泌出AiiA蛋白。抗病性分析表明，分泌表达的AiiA蛋白能有效抑制胡萝卜软腐欧文氏杆菌(Erwinia carotovora)的致病性。AiiA蛋白在毕赤酵母中的分泌表达，拓宽了AiiA蛋白的获取途径，为AiiA蛋白的产业化提供理论依据。密码子优化为今后改造AiiA蛋白，提高AiiA蛋白的表达效率提供了新的思路。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨梅	福建师范大学生命科学学院	36	249	9.0	15.0
2	何晶晶	福建师范大学生命科学学院	9	16	3.0	4.0
3	毛惠民	福建师范大学生命科学学院	6	22	3.0	4.0
4	简思美	福建师范大学生命科学学院	6	10	2.0	3.0