鼻息肉成纤维细胞在常氧与低氧环境下的原代培养及鉴定

• 作者: 周杰玉 朱慧涛 李学忠 李涛 蔡晓岚
• 来源期刊: 山东大学耳鼻喉眼学报
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻息肉 成纤维细胞 低氧 原代培养
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 76-80
• 页数: 5页
• 分类号: R765.25
• 字数: 5005字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6040/j.issn.1673-3770.0.2013.342

摘要

目的：探讨鼻息肉成纤维细胞在常氧与低氧环境下的原代培养及鉴定，以备后续研究其生物学特性。方法取2012至2013年行鼻内镜下鼻息肉切除的息肉组织20例。标本放入4℃无菌的PBS溶液中，在超净台中反复冲洗、浸泡，剪成1～2 mm大的组织块后，分成2份转入EP管中，分别用0．1％Ⅰ型胶原酶和1 mL的dispaseⅡ酶消化过夜。次日取出，轻轻吹打，进行计数后，加入培养液（DMEM＋10％胎牛血清＋1×105 U/L青霉素＋100 mg/L链霉素），分别置于常氧、低氧条件下培养（常氧培养以空气作为混合气体，氧体积分数约为20％；低氧培养则以氮气作为混合气体，调节氧体积分数为5％。二者其他培养条件相同，均为37℃、含体积分数为5％的CO2和饱和湿度）。在倒置相差显微镜下观察细胞的形态、增殖及生长状况、有无污染。用CCK-8比色法检测细胞的增殖，描绘生长曲线。结果 dispaseⅡ酶消化组的细胞数目高于Ⅰ型胶原酶消化组，两组之间差异有统计学意义（P＜0．05）。鼻息肉成纤维细胞在常氧及低氧条件下培养的生长曲线无明显差异。结论 dispaseⅡ酶消化的细胞数目较多，是一种较好的获得细胞的方法。在常氧及低氧条件下均可建立稳定、可靠的人鼻黏膜成纤维细胞原代培养模型，可为鼻息肉的相关研究提供良好的细胞系。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡晓岚	山东大学齐鲁医院耳鼻咽喉科	41	274	9.0	15.0
2	李学忠	山东大学齐鲁医院耳鼻咽喉科	58	239	9.0	13.0
3	李涛	山东大学齐鲁医院耳鼻咽喉科	90	498	12.0	18.0
4	朱慧涛	山东大学齐鲁医院耳鼻咽喉科	3	22	2.0	3.0
5	周杰玉	山东大学齐鲁医院耳鼻咽喉科	1	1	1.0	1.0