极端嗜酸硫杆菌高效筛选、高密度发酵及保藏方法的研究

• 作者: 冯守帅 杨海麟 王武 计云鹤 陈金才 高凯
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 嗜酸硫杆菌属 双层培养 补料分批策略 菌种保藏
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 生物实验室
• 页码范围: 2565-2573
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.140199

摘要

[目的]针对嗜酸硫杆菌极端特殊的生化特性,分别建立双层平板培养高效筛选方法和补料分批高密度发酵策略,并优选最佳保藏方法,以强化对该类菌种资源的利用和储备效率.[方法]分别采用以异养型微生物Sacchromyces ellipsoideu和Rhodotorula sp.为底层培养物的双层平板培养嗜酸硫杆菌,并结合透射电子显微镜技术(TEM)考察细胞形态差异.结合硫化矿培养基设计及单质硫补料培养策略,延长Acidithiobacillus thiooxidans对数期,提高比生长速率.分析不同保藏方法对嗜酸硫杆菌细胞存活率的影响.[结果]采用异养微生物——Rhodotorula sp.作为底层培养物的双层平板培养法在缩减1/3检出周期的同时将Acidithiobacillus ferrooxidans和Acidithiobacillus thiooxidans的检出率提高了3倍左右.TEM结果表明双层培养中细胞形态更为规则.采用基于Starkey-硫化矿培养基的补料分批发酵策略提高了Acidithiobacillus thiooxidans平均比生长速率,硫对生物量转化率和生产强度分别比分批培养提高31.1％和187.9％.4℃低温保藏方式更适于嗜酸硫杆菌的保藏,有效保藏期1-3月.[结论]Rhodotorula sp.为辅助培养物的双层平板培养法可有效提高嗜酸硫杆菌的筛选效率.设计的Starkey-硫化矿培养基结合补料分批培养策略可实现Acidithiobacillus thiooxidans高密度培养.简单高效的4℃低温保藏方式更适合于嗜酸硫杆菌的中短期保藏.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨海麟	江南大学生物工程学院教育部工业微生物技术重点实验室	104	690	14.0	20.0
2	冯守帅	江南大学生物工程学院教育部工业微生物技术重点实验室	11	27	3.0	4.0
3	高凯	江南大学生物工程学院教育部工业微生物技术重点实验室	1	1	1.0	1.0
4	陈金才	江南大学生物工程学院教育部工业微生物技术重点实验室	3	6	2.0	2.0
5	计云鹤	江南大学生物工程学院教育部工业微生物技术重点实验室	2	3	1.0	1.0