Real-Time PCR检测棘阿米巴方法建立及应用

• 作者: 梁韶晖 秦茜 谷禾 郑善子 韩真真
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 棘阿米巴 TaqMan探针 18s rDNA Real-time PCR qPCR
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 158-162
• 页数: 5页
• 分类号: R382
• 字数: 3363字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2014.02.011

摘要

目的 采用TaqMan探针法建立检测棘阿米巴18s rDNA的实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法,为早期诊断棘阿米巴病提供基因诊断标准方法.方法 提取实验室培养的4株土壤中分离的和1株水中分离的不同基因型棘阿米巴DNA,测序后在物种保守区域设计Real-time引物和TaqMan探针,用建立的方法检测动物模型兔眼分泌物、大肠杆菌、人巨细胞病毒、卡式肺孢子虫、疑似棘阿米巴角膜炎160例病人眼分泌物.结果 与传统实验室培养病原相比,所建立的qPCR检测棘阿米巴角膜炎方法测定大肠杆菌、人巨细胞病毒和卡式肺孢子虫与该研究的实验室分离棘阿米巴物种没有交叉反应,检测结果均为阴性.而160例疑似病人,用培养法检测出感染棘阿米巴患者为5例,用qPCR方法检测出6例,其中5例为培养法测出患者,qPCR方法检测阳性率(3.75%)略高于普通培养法(3.13%),但无统计学意义(P>0.05).qPCR方法在95%置信区间中灵敏度100%(47.95%~100%)高于普通培养法83.33%(36.10%~97.24%).结论 所建立测定棘阿米巴18s rDNA的Real-time PCR基因检测方法具有无创伤性、高效、特异、经济等特点,适用于疑似棘阿米巴角膜炎病人门诊筛选的有效方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑善子	延边大学寄生虫教研室	22	45	4.0	6.0
2	谷禾	温州医科大学附属二院放射科	9	134	4.0	9.0
3	梁韶晖	温州医科大学寄生虫学教研室	13	20	3.0	3.0
4	秦茜	温州医科大学寄生虫学教研室	1	2	1.0	1.0
5	韩真真	温州医科大学附属二院眼科	1	2	1.0	1.0