环介导等温扩增联合横向流动试纸条快速检测创伤弧菌检测方法的建立

• 作者: 周前进 王瑞娜 王耀焕 陈炯
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 创伤弧菌 外膜蛋白TolC基因 环介导等温扩增技术 横向流动试纸条检测
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 81-87
• 页数: 7页
• 字数: 5499字
• 语种: 中文

摘要

环介导等温扩增技术（LAMP）与横向流动试纸条（LFD）检测联合应用，建立了一种新的快速、便捷的创伤弧菌检测方法。针对创伤弧菌的外膜蛋白TolC基因设计6条特异性引物和1条异硫氰酸荧光素（FITC）标记的探针。生物素标记的LAMP扩增产物能够特异性地与FITC标记的探针杂交，杂交产物经LFD检测。优化后的扩增温度和时间为63℃反应35 min，加上细菌基因组DNA提取步骤，完成检测仅需要80 min。LAMP-LFD方法可特异性地检出创伤弧菌，对哈维氏弧菌等9种水产品常见病原菌的检测均呈阴性；对纯细菌培养物的检测灵敏度为3.7×102 CFU/mL或7.4 CFU/反应，是利用外引物建立的常规PCR检测的100倍。结果表明，该方法能够准确、快速、灵敏地检出创伤弧菌，可应用于创伤弧菌污染的水产品的检测。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈炯	宁波大学生物化学与分子生物学实验室	100	594	13.0	18.0
2	周前进	宁波大学生物化学与分子生物学实验室	14	95	6.0	9.0
3	王瑞娜	宁波大学生物化学与分子生物学实验室	4	57	4.0	4.0
4	王耀焕	宁波大学生物化学与分子生物学实验室	1	15	1.0	1.0