国兰杂交品种(系)SRAP-PCR反应体系优化及引物快速筛选

• 作者: 吴少华 李永裕 王芳 陈倩淑 黄添毅 龚理
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: SRAP-PCR 体系优化 DNA混合池 引物筛选
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 925-932
• 页数: 8页
• 分类号: S682.31
• 字数: 4430字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2014.05.016

摘要

以国兰杂交品种(系)为材料,采用L16(45)正交试验设计对Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、模板及引物等5个重要影响因素进行优化,确定国兰杂交品种(系)SRAP-PCR反应的最优反应体系为(25 μL体系):TaqDNA聚合酶,1U; Mg2+,1.8 mmol/L; dNTPs,0.08 mmol/L;模板DNA,100 ng;引物,上下游各0.3 mmol/L;10×PCR Buffer,2.5 μL.此外,本试验采用DNA混合池技术(DNA pooling)快速筛选SRAP引物,从180对SRAP引物组合中筛选出39对扩增产物丰富、多态性高的引物组合.与常规方法相比,该技术明显缩短试验周期、节约了模板用量,为快速高效筛选SRAP引物提供了新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴少华	福建农林大学园艺学院	121	789	16.0	23.0
2	李永裕	福建农林大学园艺学院	50	381	9.0	18.0
3	龚理	福建农林大学园艺学院	2	5	1.0	2.0
4	黄添毅	福建农林大学园艺学院	5	11	2.0	3.0
5	王芳	福建农林大学园艺学院	19	81	5.0	8.0
6	陈倩淑	福建农林大学园艺学院	1	5	1.0	1.0